鞘氨醇激酶-1抑制劑二甲基鞘氨醇對人胃腺癌細(xì)胞SGC7901增殖和凋亡的實驗研究.pdf

1、目的：探討鞘氨醇激酶-1(SPHK1)抑制劑二甲基鞘氨醇(N，N-dimethylsphingosine，DMS)對人胃腺癌細(xì)胞株SGC7901增殖和凋亡的影響。 方法：體外培養(yǎng)人胃腺癌細(xì)胞株SGC7901，應(yīng)用RT-PCR法檢測不同濃度的SPHK1抑制劑DMS作用下SPHK1 mRNA表達(dá)；應(yīng)用不同濃度的DMS處理SGC7901細(xì)胞，利用MTT比色法、生長曲線測定觀察DMS對SGC7901細(xì)胞增殖的影響；同時利用流式細(xì)胞儀檢測

2、細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：DMS對SGC7901細(xì)胞SPHK1 mRNA表達(dá)有影響，不同濃度DMS處理SGC7901細(xì)胞24h后，細(xì)胞SPHK1 mRNA表達(dá)有差異，隨著濃度的增加，其表達(dá)減弱，不同濃度DMS(0、1、5、25)μmol/L的SPHK1與GAPDH灰度比分別為0.8±0.03、0.73±0.02、0.66±0.03、0.40±0.03，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。DMS對SGC7901細(xì)胞具有明顯的生長抑制作用

3、，不同濃度的DMS(1、5、25)μmaol/L處理SGC7901細(xì)胞24h后的抑制率分別為12.33±2.86％、30.07±2.16％、56.25±1.50％；48h后為37.43±1.97％、53.32±2.64％、72.98±1.52％；72h后為47.10±2.52％、68.87±1.93％、87.83±0.48％。各時間段處理組與對照組相比抑制率均明顯增加(P<0.05)。不同濃度DMS作用24h、48h、72h抑制率具有顯

4、著性差異(P<0.05)。同時流式細(xì)胞術(shù)顯示DMS能以濃度依賴的形式誘導(dǎo)SGC7901細(xì)胞凋亡。不同濃度DMS(0、1、5、25)μmol/L處理SGC7901細(xì)胞12h后，其凋亡率分別為1.48±0.39％、9.08±2.04％、21.13±3.07％和35.49±4.12％，明顯高于對照組的1.48±0.39％(P<0.05)。 結(jié)論：1、DMS對SGC7901細(xì)胞SPHK1 mRNA表達(dá)有影響，可以認(rèn)為SPHK1在SGC7