急性肝衰竭小鼠外周血及肝組織T細(xì)胞亞群TIM-3表達(dá).pdf

1、目的:探討Tim-3在急性肝衰竭小鼠外周血及肝組織T細(xì)胞亞群表達(dá)及其在肝衰竭發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法:
　　1、應(yīng)用硫代乙酰胺（TAA）按350mg/kg分別于0h、24h腹腔注射制作急性肝衰竭小鼠模型。
　　2、觀察小鼠的一般情況，組織病理學(xué)表現(xiàn)以及外周血生化指標(biāo)，檢驗(yàn)急性肝衰竭小鼠造模效果。
　　3、應(yīng)用熒光定量PCR檢測(cè)肝臟組織Tim-3 mRNA表達(dá)。
　　4、留取急性肝衰竭小鼠以及正常對(duì)照組小

2、鼠肝臟組織，應(yīng)用密度梯度離心法分離肝臟單個(gè)核細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Tim-3在T細(xì)胞亞群中表達(dá)。
　　5、留取急性肝衰竭組小鼠以及正常對(duì)照組小鼠外周血，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Tim-3在T細(xì)胞亞群中表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、正常對(duì)照組小鼠一般情況良好，活動(dòng)自如，反應(yīng)靈敏，進(jìn)食進(jìn)水正常。急性肝衰竭組小鼠，在腹腔注射TAA后，逐漸出現(xiàn)懶動(dòng)，進(jìn)食進(jìn)水減少，24h時(shí)重復(fù)注射一次后，上述癥狀加重，體重減輕，精神差，進(jìn)食減少，毛發(fā)

3、散亂無(wú)光澤，反應(yīng)遲鈍。急性肝衰竭小鼠血清ALT、AST、TB較正常組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-24.71，p＜0.05;t=-13.76，p＜0.05;t=-3.62，p＜0.05）。肝臟組織病理:正常組肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝板排列整齊，肝細(xì)胞未見(jiàn)變性及壞死，匯管區(qū)無(wú)淤血及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。肝衰竭組肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞可見(jiàn)大量壞死，匯管區(qū)淤血明顯，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　2、急性肝衰竭組小鼠肝臟組織Tim-3mRNA表達(dá)量較正

4、常組顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-6.68，p＜0.05)。
　　3、急性肝衰竭組小鼠肝組織及外周血CD4+T細(xì)胞表面Tim-3表達(dá)量分別較正常對(duì)照組肝組織及外周血高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-5.92，p＜0.05;t=-2.78，p＜0.05)。
　　4、正常對(duì)照組及急性肝衰竭組肝組織CD4+T細(xì)胞表面Tim-3表達(dá)量分別較其外周血高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-10.91，p＜0.05; t=-11.93，p＜0.

5、05)。
　　5、急性肝衰竭組小鼠肝組織及外周血CD8+T細(xì)胞表面Tim-3表達(dá)量分別較正常對(duì)照組肝組織及外周血高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-3.83，p＜0.05;t=-2.91，p＜0.05)。
　　6、正常對(duì)照組及急性肝衰竭組肝組織CD8+T細(xì)胞表面Tim-3表達(dá)量分別較其外周血高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-4.80，p＜0.05;t=-5.76，p＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、急性肝衰竭組小鼠肝組織