表達(dá)大腸桿菌外膜蛋白抗原的減毒雞傷寒沙門菌重組疫苗的構(gòu)建及免疫保護(hù)研究.pdf

1、表達(dá)大腸桿菌外膜蛋白抗原的減毒雞傷寒沙門菌重組疫苗的構(gòu)建及免疫保護(hù)研究ConstructionoforalattenuatedrecombinantSalmonellaGallinarumSG9RvaccinecandidateexpressingoutermembraneproteinofEcoliandrelatedimmunoprotectionstudy研究生：鄒雅潔導(dǎo)師：朱國強(qiáng)教授揚(yáng)州大學(xué)畜禽病原微生物研究室II揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)

2、位論文集各組免疫雞免疫后不同時間段血清，利用間接ELISA法測定其體內(nèi)特異性IgG抗體動態(tài)水平，首次免疫14d后，重組疫苗菌免疫組血清IgG抗體水平明顯高于空載體對照組和PBS空白對照組(P005)。在二免兩周后收集并制備氣管粘膜液樣品和腸粘膜液樣品，利用間接ELISA法測定其體內(nèi)特異性sIgA抗體水平，SG9R(pYA3342S632)免疫組可在雞的十二指腸粘膜中檢測到特異性slgA抗體。免疫后，每組每周隨機(jī)抽取3只試驗(yàn)雞，分離外周血

3、淋巴細(xì)胞，利用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)監(jiān)測每組雞外周血中CD3和CD8T淋巴細(xì)胞動態(tài)變化。結(jié)果顯示，免疫后外周血中CD3T細(xì)胞及CD8T細(xì)胞含量均呈逐漸增加的趨勢，各時期含量均高于PBS對照組，在二次免疫一周后達(dá)到較高水平隨后保持平穩(wěn)。用禽致病性大腸桿菌強(qiáng)毒株QD2(078：H54)分別對各實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行后胸氣囊攻毒，觀察10d內(nèi)，重組疫苗菌免疫組、空載體對照組及空白對照組的死亡率分別為200％、700％和800％。用腸炎沙門氏菌50336菌株