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文檔簡介
1、阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一種與年齡密切相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。AD特征性的神經(jīng)病理改變是腦組織細胞外神經(jīng)炎性斑塊(Neuriteplaques,NP)和細胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)(Neurofibrillary tangle,NFT)形成,以及神經(jīng)元突觸的丟失或神經(jīng)元數(shù)量的減少。AD患者腦內(nèi)Aβ1-40和Ap1-42水平與其認知功能明顯相關(guān)。異常突變的淀粉樣前體蛋白(Amyloid precursor pro
2、tein,APP)直接影響了β-和γ分泌酶對APP的剪切效率和產(chǎn)物,與Aβ異常增加有關(guān)。大多數(shù)的APP在α分泌酶作用下通過非淀粉源途徑代謝,APP在β-和γ分泌酶作用下通過淀粉源途徑剪切形成Aβ。β-分泌酶是Aβ產(chǎn)生的限速酶,BACE1是最重要的β-分泌酶,BACE1的調(diào)節(jié)受多種因素影響,BACE1的啟動子包含PPARγ、NF-κB等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。 人參皂苷Rg1是人參具有代表性的單體成分。研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)Rg1能顯著改善多種動
3、物模型的學(xué)習(xí)記憶能力。因此本課題觀察人參皂苷Rg1能否通過影響Aβ的生成和代謝,從源頭上緩解或/和減輕AD病人的神經(jīng)病理改變。利用穩(wěn)定表達突變型APP695的N2a細胞(N2a/APP695),通過ELISA檢測Aβ觀察人參皂苷Rg1是否影響Aβ生成,然后利用RT-PCR、蛋白免疫印跡、激光共聚焦顯微鏡等方法探討人參皂苷Rg1對Aβ代謝有關(guān)的β-分泌酶及其上游轉(zhuǎn)錄因子的活性等方面的影響。研究結(jié)果如下: 1、人參皂苷Rg1能降低N
4、2a/APP695細胞外液Aβ1-40和Aβ1-42水平,而對APP蛋白表達水平?jīng)]有明顯的影響。 2、2.5μM人參皂苷Rg1作用6-12h后,N2a/APP695細胞BACE1的mRNA和蛋白水平顯著降低,同時β分泌酶產(chǎn)物β-CTF的蛋白水平降低,相反α分泌酶產(chǎn)物α-CTF的蛋白水平增加。 3、人參皂苷Rg1作用后,N2a/APP695細胞PPARγ和NF-κB p65蛋白表達水平明顯增加并誘導(dǎo)促進PPARγ和NF-κ
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