體外抑制幽門螺桿菌的人源乳酸桿菌的選育.pdf

1、[目的]幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)作為慢性胃炎、消化性潰瘍甚至胃癌的主要致病因素，至今仍沒有理想的根治方法。微生態(tài)療法從一個嶄新的角度擬解決傳統(tǒng)療法存在的各種問題，而且微生態(tài)調(diào)節(jié)劑的作用不僅僅在于抗感染，還能調(diào)節(jié)機體的免疫機能，改善胃腸道微生態(tài)環(huán)境，促進健康。本課題在國內(nèi)外疫苗發(fā)展和乳酸桿菌防治幽門螺桿菌(Hp)成功經(jīng)驗的基礎上，直接從胃腸道標本中篩選出具有良好抑制或殺滅幽門螺桿菌且具有高度胃粘膜粘附能力的

2、乳酸桿菌，并進行鑒定。為開發(fā)優(yōu)良的抑制幽門螺桿菌的微生態(tài)制劑及相關的保健食品，提供良好的乳酸桿菌菌種；為研究和發(fā)展Hp基因工程生物活菌疫苗提供良好的載體釋放系統(tǒng)。同時初步探討乳酸桿菌抑制Hp粘附胃粘膜的機理。 [方法] 1、乳酸桿菌的分離與初步鑒定：采集臨床胃病患者胃粘膜組織的活檢標本和胃液標本，以及正常人糞便標本，采用選擇性培養(yǎng)基分離可疑乳酸桿菌并進行初步鑒定。 2、篩選具有良好抑制或殺滅幽門螺桿菌并具有較強胃

3、粘膜粘附能力的乳酸桿菌：2.1采用打孔法篩選對Hp抑菌力強的乳酸桿菌菌株。 3、乳酸桿菌抑制Hp粘附胃粘膜機理的初步探討：通過幽門螺桿菌標準株SS1粘附胃粘膜上皮細胞SGC7901的細胞模型，利用間接熒光抗體試驗，建立乳酸桿菌對Hp粘附SGC7901細胞的抑制試驗，并檢測乳酸桿菌活菌和滅活菌株對Hp標準株SS1粘附能力的抑制作用。@24、對篩選菌株的最終鑒定：根據(jù)細菌菌落形態(tài)、生化反應，應用API50CHL乳酸桿菌系統(tǒng)生化鑒定卡

4、鑒定細菌到種。 [結(jié)論]1、篩選出四株具有良好抑制幽門螺桿菌并具有一定胃粘膜粘附能力的，一定耐酸耐膽鹽能力的乳酸桿菌。 2、乳酸桿菌的活菌及其滅活菌株均具有良好的抑制Hp粘附SGC7901細胞的能力，活菌與滅活菌對Hp粘附SGC7901細胞的抑制能力無顯著性差別。 3、建立了乳酸桿菌抑制Hp粘附SGC7901細胞的試驗方法。所查中文文獻中未見相關報道。 4、經(jīng)鑒定，篩選出的四株菌3株為唾液乳桿菌，1株為植