真菌行黃干預(yù)TNFα信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的作用機(jī)理研究.pdf

1、目的:為驗(yàn)證真菌竹黃的抗炎和抗腫瘤功效及其作用機(jī)理,本研究引入TNFα誘導(dǎo)的L929細(xì)胞作為模型,觀察竹黃對(duì)模型細(xì)胞的影響,并從分子水平探索竹黃對(duì)TNFα信號(hào)通路上關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響,分析竹黃抗腫瘤和抗炎功效的可能作用機(jī)制。相關(guān)研究將為科學(xué)合理的開(kāi)發(fā)利用竹黃這一中藥資源提供理論實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:(1)應(yīng)用SRB染色法測(cè)繪制生長(zhǎng)曲線;(2)利用倒置顯微鏡和熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變:(3)流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡率的變化

2、和對(duì)細(xì)胞周期產(chǎn)生的影響;(4)Western Blotting檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)NF-κB P65蛋白、COX-2蛋白和BCL-2蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:(1)竹黃在一定濃度范圍內(nèi)能有效降低TNFα對(duì)L929細(xì)胞的抑制作用,但當(dāng)竹黃濃度達(dá)到30μg/ml時(shí)反過(guò)來(lái)促進(jìn)TNFα對(duì)L929細(xì)胞的抑制作用;(2)竹黃能減輕TNFα誘導(dǎo)L929細(xì)胞后產(chǎn)生的S期阻滯現(xiàn)象;(3)竹黃對(duì)NF-κB P65蛋白的表達(dá)影響很小,只有達(dá)到至少30μ/m