青海血蜱體內牛羊梨形蟲PCR檢測技術的建立和應用.pdf

1、青海血蜱(Haemaphysalisqinghaiensis)是我國命名的蜱種，研究表明它是羊的尤氏泰勒蟲、呂氏泰勒蟲、羊巴貝斯蟲和牛的中華泰勒蟲等四種梨形蟲病的傳播媒介，這些病原都直接危害著我國畜牧業(yè)的發(fā)展。傳統(tǒng)的病原檢測方法主要以顯微鏡鏡檢查為主，這既費時又不敏感，且很難區(qū)分四種病原。本實驗以四種梨形蟲的18SrRNA基因序列為依掘，利用該基因在生物進化過程中形成的保守性區(qū)域和不同蟲種間的高變區(qū)域，分別設計了梨形蟲的通用引物和針對不

2、同蟲種的種特異引物，建立了套式PCR方法，并運用所建立的方法對青海血蜱體內梨形蟲的感染狀況進行了檢測。結果表明：該方法對尤氏泰勒蟲、呂氏泰勒蟲、中華泰勒蟲和羊巴貝斯蟲基因組DNA的敏感性分別是0.1pg、1ng、10pg和100pg。通過對采自甘肅省甘南臧族自治州臨潭縣的136份青海血蜱樣品(其中雌蜱55份，雄蜱81份)進行檢測，其中感染蜱62份，感染率為45.59﹪；混合感染蜱12份，混合感染率為19.35﹪。尤氏泰勒蟲、呂氏泰勒蟲和

3、牛中華泰勒蟲三種病原混合感染的有2份；羊巴貝斯蟲和尤氏泰勒蟲兩種病原混合感染的有1份；尤氏泰勒蟲和呂氏泰勒蟲兩種病原混合感染的有9份。感染的雌蜱27份，占檢查雌蜱總數(shù)的49.1﹪，感染的雄蜱35份，占檢查雄蜱總數(shù)的43.2﹪。帶有尤氏泰勒蟲的蜱62份，感染率為45.59﹪，呂氏泰勒蟲感染9份，感染率為6.62﹪，中華泰勒蟲感染2份，感染率為1.47﹪，2份均為雌蜱；羊巴貝斯蟲感染1份為雄蜱，感染率為0.74﹪。檢測發(fā)現(xiàn)尤氏泰勒蟲和呂氏泰