尿道下裂的分子病因學研究.pdf

1、目的：利用全外顯子測序技術結合尿道下裂家系，尋找尿道下裂新的可疑易感基因，分析可疑易感基因的相關功能和作用途徑，得到優(yōu)選新致病基因,為后續(xù)開展新致病基因的生物信息學和功能小鼠模型研究提供依據(jù)，從而進一步闡明尿道下裂的分子發(fā)病機制。
　　方法：本課題組收集了一個珍貴的尿道下裂家系，對家系中所有患者利用PCR、毛細管電泳技術進行已報道易感基因的篩查，排除已知易感基因在該家系中的影響。在此研究結果上，利用全外顯子測序技術對該家系開展研究

2、，將得到的外顯子數(shù)據(jù)結合大量公共數(shù)據(jù)庫提供的外顯子數(shù)據(jù)開展分析，解釋研究結果，發(fā)現(xiàn)可疑新致病基因。同時將可疑新致病的突變位點在家系正常男性中進行篩查，排除非致病基因突變后，得到優(yōu)選新致病基因，收集、分析高度可疑新致病基因的功能后得到優(yōu)選新致病基因。
　　結果：本課題組排除了已報道易感基因對該尿道下裂家系樣本的影響，后對該家系中3名患者開展全外顯子測序，將獲得的數(shù)據(jù)利用公共數(shù)據(jù)庫提供的外顯子數(shù)據(jù)進行比對和分析，找出3位患者共有的異常

3、位點，發(fā)現(xiàn)了分布于17個不同基因的12個位點插入/缺失和7個位點改變，將這些異常位點在家系正常男性中進行篩查，共得到分布于6個可疑致病基因的6個位點改變，收集、分析可疑新致病基因的功能，在這些可疑基因中包含著一些值得深入研究的基因，SRA1基因與性激素受體信號通路有關，NOTCH2NL基因可能介導多種細胞的細胞間的相互作用。
　　結論：本課題組的研究通過全外顯子測序技術在尿道下裂家系中發(fā)現(xiàn)的可疑基因符合我們初期對可疑基因數(shù)目的估計