紅掌離體化學(xué)誘變技術(shù)的研究.pdf

1、紅掌(Anthurium andraeaum）為天南星科花燭屬多年生草本花卉，因其花色豐富、花葉形態(tài)獨(dú)特、花期持久，被廣泛應(yīng)用于切花材料與盆栽觀賞，具有極高的觀賞價(jià)值和商業(yè)價(jià)值。近年來，隨著紅掌產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，人們對(duì)紅掌品種的多樣化需求日趨明顯。為了創(chuàng)新紅掌種質(zhì)、豐富育種素材，本研究以秋水仙素和甲基磺酸乙酯（EMS）為誘變劑，以紅掌愈傷組織為材料，探討了2種誘變劑對(duì)紅掌愈傷組織生長分化的影響及其誘變效應(yīng)，并對(duì)誘變材料進(jìn)行了鑒定與分析，取

2、得的主要結(jié)果如下。
　　1、紅掌多倍體離體誘導(dǎo)。分別以添加0.2、0.3、0.45 g/L（W/V）秋水仙素的液體培養(yǎng)基誘變處理紅掌愈傷組織3、6、9、14 d，以獲得多倍體植株。秋水仙素誘導(dǎo)多倍體的最佳處理組合為濃度0.3 g/L、處理時(shí)間9 d，再生苗變異率可達(dá)60％。在獲得的再生苗群體中發(fā)現(xiàn)了9種不同類型的形態(tài)變異，其中加倍植株具有株型矮小、莖稈粗壯、葉片小而厚實(shí)、葉色濃綠、生長緩慢等特征。
　　2、紅掌多倍體植株的倍

3、性鑒定。采用壓片法對(duì)根尖進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)鑒定，從變異植株中檢測(cè)到了四倍體細(xì)胞，其染色體數(shù)為2n=4x=60；而對(duì)照植株為二倍體，染色體數(shù)為2n=2x=30。在流式細(xì)胞儀（FCM）的倍性鑒定試驗(yàn)中，核提取液篩選結(jié)果表明，WPB緩沖液和Tris·MgCl2緩沖液均適合紅掌FCM的細(xì)胞核提取，細(xì)胞核提取的數(shù)目多，變異系數(shù)小；染色體計(jì)數(shù)為四倍體的紅掌植株在相對(duì)熒光強(qiáng)度180處和相對(duì)熒光強(qiáng)度約360處均出現(xiàn)一個(gè)單峰，而二倍體僅在相對(duì)熒光強(qiáng)度180處

4、出現(xiàn)一個(gè)單峰，說明這些含四倍體細(xì)胞的再生苗為混倍體。
　　3、紅掌EMS離體誘變。采用濃度分別為0.2、0.4、0.6%的EMS對(duì)紅掌愈傷組織誘變處理12、24、36 h，以期獲得遺傳變異的突變體材料。結(jié)果表明，EMS處理對(duì)愈傷組織生長的影響較大，部分愈傷組織褐化或致死，且與處理強(qiáng)度有關(guān)。在本試驗(yàn)條件下，紅掌愈傷組織以EMS0.6%、處理12 h為宜，其致死率接近半致死劑量。再生苗表型變異較多，本試驗(yàn)共得到13株表型變異的再生苗。