K-,ATP-通道介導(dǎo)的一氧化氮對心肌細胞缺氧復(fù)氧損傷保護作用的研究.pdf

1、研究背景與目的心肌缺血-再灌注損傷是指經(jīng)一定時間缺血/氧的心肌恢復(fù)血/氧供應(yīng)后心肌損傷反而加重的現(xiàn)象.長期以來,心肌保護作用一直是心血管領(lǐng)域的研究熱點,缺血預(yù)處理現(xiàn)象(IPC)是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強的一種內(nèi)源性心肌保護機制.但是IPC其本身并無治療學(xué)價值,無法將其直接用于臨床.由于藥理性預(yù)處理更具臨床實用意義,使其成為近年來心肌保護研究方面的熱點.因此尋找藥物以模擬IPC保護作用是目前研究的重點和最終目的所在.對IPC機制的研究發(fā)現(xiàn)有多種

2、物質(zhì)參與了此保護作用.但是縱觀這些可誘導(dǎo)預(yù)處理保護作用的藥物,不難發(fā)現(xiàn),NO具有其獨特的優(yōu)勢即NO供體藥在臨床上已廣泛應(yīng)用,而且百年的應(yīng)用歷史證明了其安全性,盡管在心血管系統(tǒng)NO對心肌細胞究竟是保護還是毒性作用目前仍有爭議,但絕大多數(shù)研究已越來越傾向于其具有心肌保護作用.目前有關(guān)心肌IP中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究較多,但心肌中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑非常復(fù)雜,心肌細胞K<,ATP>通道作為該途徑的終末效應(yīng)日益受到重視.最近研究表明K<,ATP>開放對心肌產(chǎn)生

3、保護作用,并已在培養(yǎng)的大鼠及人心房心肌細胞得到證實.該課題應(yīng)用外源性NO供體預(yù)處理細胞,模擬IP的作用.研究NO對缺氧復(fù)氧心肌細胞的作用,深入探討K<,ATP>通道介導(dǎo)的NO對心肌細胞缺氧復(fù)氧損傷的保護作用.方法以離體培養(yǎng)的新生鼠心肌細胞,建立心肌細胞缺氧復(fù)氧模型.采用NO供體(SNAP)、優(yōu)降糖作干預(yù)因素,并隨機分組.用熒光顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué):通過丙二醛(MDA)含量測定,反映氧化水平:用激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)測定細胞內(nèi)游離Ca<