游離的LIF受體α亞基胞內(nèi)區(qū)遠膜端對HL-60細胞增殖分化的影響.pdf

1、該研究首先成功篩選并建立了兩種白血病(HL-60)細胞株即pcDNA3.0-190CT3重組子白血病細胞株、pcDNA3.0空載體白血病細胞株,利用細胞計數(shù)、免疫組化、免疫沉淀、蛋白印跡、流式細胞儀等生物學(xué)實驗方法,從形態(tài)學(xué)、蛋白表達量、磷酸化水平等方面分析細胞形態(tài)變化、細胞增殖核抗原(PCNA)和CD15在三種細胞株中的表達情況及Stat3、P44/42 MAPK磷酸化水平,進而分析190CT3是否可以替代LIF啟動下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),進

2、而抑制白血病細胞的增殖并促進其分化;另一方面我們通過不同細胞株注射的裸鼠各器官的增生及淋巴細胞侵潤情況的比較,分析不同細胞株的惡性程度,進而分析在動物體內(nèi)190CT3是否有抑制白血病細胞增殖的作用.結(jié)果表明:190CT3 cDNA可以在白血病HL-60細胞中表達,并且在沒有LIF刺激的情況下,替代LIF,獨立開啟下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,激活Stat3和P42/44 MAPK等信號分子.通過PCNA的表達水平說明了細胞的增殖情況,粒細胞表面標

3、志CD15的表達水平說明了白血病HL-60細胞向粒細胞系的分化情況.該研究結(jié)果表明:190CT3重組子可以在白血病HL-60細胞中表達,且在沒有LIF刺激的情況下可以激活下游的信號分子,啟動LIFR的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),抑制白血病HL-60細胞的增殖,促進其分化.這同時也說明,190CT3在啟動白血病細胞LIFR的信號通路中發(fā)揮了重大作用.這也提示我們,可構(gòu)建190CT3分子代替LIF誘導(dǎo)白血病細胞生長抑制,同時克服白血病細胞對LIF不敏感的不足