利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將HLF和SB401雙基因?qū)胨镜难芯?pdf

1、水稻(Oryxa sativa L．)是世界上最重要的糧食作物之一，我國(guó)一半以上人口以稻米為主食。現(xiàn)在育種技術(shù)的發(fā)展，可以使水稻在特定區(qū)域和/或栽培條件下畝產(chǎn)達(dá)到1000公斤以上，保證水稻的高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)，人們不再拘泥于溫飽，而對(duì)稻米營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的要求越來越高，所以更多的育種家們希望培育出顆粒飽滿，色澤潔白，米質(zhì)油潤(rùn)、味道香甜，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、必需氨基酸、必需脂肪酸等成分的優(yōu)良品種。因此蛋白質(zhì)和必需氨基酸的含量成為人們首先關(guān)注的兩大營(yíng)養(yǎng)特性

2、。 利用傳統(tǒng)育種手段或通過將含有相應(yīng)外源基因的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行有性雜交皆可改良蛋白質(zhì)品質(zhì)等農(nóng)藝性狀，但兩種方法的缺點(diǎn)都是育種周期長(zhǎng)，見效慢。而將控制不同農(nóng)藝性狀的多個(gè)基因構(gòu)建在同一載體的同一T-DNA上，導(dǎo)入目標(biāo)水稻中，是同時(shí)改良水稻多個(gè)目標(biāo)性狀的一條有效途徑。本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將構(gòu)建在同一載體T-DNA上的人乳鐵蛋白基因(hLF)和富含賴氨酸的馬鈴薯花粉特異水溶性蛋白基因(sb401)導(dǎo)入兩個(gè)水稻品種中，取得了以下結(jié)果：

3、 1．通過對(duì)比觀察外植體的誘導(dǎo)情況和愈傷狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)：中花15和粳抗5號(hào)的幼胚誘導(dǎo)率最高，并且愈傷狀態(tài)最好；中花15的愈傷誘導(dǎo)率高于粳抗5號(hào)，但從愈傷狀態(tài)上看，粳抗5號(hào)更適合用作懸浮培養(yǎng)。 2．粳抗5號(hào)在50天之內(nèi)就可以建立良好的懸浮細(xì)胞系，對(duì)其懸浮細(xì)胞不同時(shí)期的生長(zhǎng)特性測(cè)定和分化表現(xiàn)觀察，確定了懸浮細(xì)胞每次繼代的最佳時(shí)間為7-10天，懸浮細(xì)胞培養(yǎng)中期的再生能力最好。 3．以潮霉素作為篩選劑分別對(duì)中花15和粳抗5號(hào)愈