生長抑素對GBC-SD細胞周期調(diào)控功能影響的機制觀察.pdf

1、目的:觀察生長抑素作用后膽囊癌細胞對阿霉素化療敏感性的變化；分析生長抑素對膽囊癌細胞周期及拓撲異構酶表達的影響；初步探討其分子生物學機制。 方法:(1) 選取人膽囊癌細胞株GBC-SD，常規(guī)體外培養(yǎng)，并驗證其成瘤性及病理組織類型。(2) 以生長抑素處理GBC-SD細胞，24h后加入梯度濃度的化療藥物阿霉素，觀察癌細胞的生長曲線，并與單獨使用化療藥物的癌細胞生長曲線相比較。(3) 選擇耐藥實體瘤細胞株MCF-7和胚肺纖維母細胞株M

2、RC-5分別作為陽性和陰性對照，選擇細胞周期調(diào)控點特異性抑制劑（L-mimosine、Aphidicolin）作為參照，以流式細胞技術檢測膽囊癌細胞在生長抑素作用下細胞周期的變化情況；并通過蛋白免疫印跡技術觀察生長抑素對膽囊癌細胞拓撲異構酶Ⅱα表達的影響。(4) 以蛋白免疫印跡技術檢測生長抑素對膽囊癌細胞P53及Rb基因表達的影響。 結(jié)果:(1) GBC-SD細胞在體外常規(guī)培養(yǎng)，生長旺盛；裸鼠接種4周后可見明顯荷瘤，病理切片鏡

3、下見腺癌組。(2) 對GBC-SD細胞聯(lián)合應用生長抑素和阿霉素，可明顯抑制膽囊癌細胞的生長，并呈現(xiàn)濃度-效應依賴關系，對癌細胞的殺傷作用明顯強于單用阿霉素組（P<0.05）。(3) GBC-SD細胞經(jīng)生長抑素處理后，細胞周期以S期為主，其S期細胞比例與空白組細胞比較有明顯的差異（P<0.05）；生長抑素對MRC-5細胞有增加G0/G1期細胞比例，減少S期細胞比例的趨勢（P>0.05）；對MCF-7細胞株的周期影響效果并不明顯（P>0.0

4、5）；生長抑素處理組GBC-SD細胞的拓撲異構酶Ⅱα的表達明顯增高。(4) 生長抑素處理組GBC-SD細胞P53蛋白表達與空白組比較未見明顯的差異；而其磷酸化Rb蛋白表達上調(diào)，去磷酸化狀態(tài)的Rb蛋白較空白組表達減少。 結(jié)論:對GBC-SD細胞聯(lián)合生長抑素應用化療藥物阿霉素，可明顯提高癌細胞對阿霉素的敏感性，抗癌效果較單獨用化療藥物有明顯提高；生長抑素可明顯增加GBC-SD細胞S期比例，增加阿霉素作用敏感點的靶細胞數(shù)量；同時其具