生長(zhǎng)抑素對(duì)急性胰腺炎治療機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：用八肽膽囊收縮素（cholecystokinin-octapeptide，CCK-8）建立體外急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）模型，研究生長(zhǎng)抑素（somatostatin，SS）對(duì)CCK-8刺激的大鼠胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)骨架蛋白F-actin分布變化和細(xì)胞外分泌功能的影響。
　　 方法：分離的19只SD大鼠胰腺腺泡細(xì)胞，設(shè)空白對(duì)照組、不同濃度CCK-8組（10-12，10-11，10-10，10-9，10

2、-8mol/L）、SS組（10-7mol/L）、SS+CCK-8組。不同濃度的CCK-8和/或10-7mol/L SS孵育胰腺腺泡細(xì)胞30 min，用淀粉酶、胰蛋白酶試劑盒檢測(cè)胰腺腺泡細(xì)胞淀粉酶分泌率、胰蛋白酶活性，用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)F-actin分布的變化。
　　 結(jié)果：CCK-8誘導(dǎo)的淀粉酶分泌率呈雙相曲線，低濃度CCK-8組（10-12，10-11，10-10mol/L），淀粉酶分泌率呈劑量依賴，高濃度CCK-8

3、組（10-9mol/L，10-8mol/L），淀粉酶分泌被抑制；10-10mol/LCCK-8時(shí)，細(xì)胞內(nèi)胰蛋白酶活性明顯升高（P<0.05），10-9mol/L后升高更為急??；CCK-8刺激濃度達(dá)10-9mol/L后，細(xì)胞內(nèi)F-actin出現(xiàn)重新分布，近細(xì)胞頂部區(qū)域/細(xì)胞基底部側(cè)面的比值與對(duì)照組比較，出現(xiàn)顯著改變（P<0.05）。SS能穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)骨架蛋白結(jié)構(gòu)，明顯提高F-actin近細(xì)胞頂部/側(cè)基底部的比值（P<0.05）；SS與低濃度

4、的CCK-8（10-11，10-10 mol/L）共同孵育胰腺腺泡細(xì)胞時(shí)，CCK-8誘導(dǎo)的細(xì)胞淀粉酶分泌明顯被抑制（P<0.05），SS與高濃度CCK-8（10-9，10-8 mol/L）共同孵育胰腺腺泡細(xì)胞時(shí)，緩解了高濃度CCK-8誘導(dǎo)的對(duì)細(xì)胞淀粉酶分泌的抑制效應(yīng)；SS降低了CCK-8誘導(dǎo)的胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)胰蛋白酶的活性（P<0.05）。
　　 結(jié)論：成功建立了體外AP模型，SS穩(wěn)定了骨架蛋白的結(jié)構(gòu)，阻止了腺泡細(xì)胞內(nèi)胰蛋白酶原的