金免疫幽門螺桿菌抗原檢測(cè)方法的探討與研究.pdf

1、目的：探討斑點(diǎn)膠體金免疫法檢測(cè)患者不同體液中幽門螺桿菌(HP))抗原的可行性，為臨床研發(fā)簡(jiǎn)單易用的“HP抗原金免疫色譜檢測(cè)試劑盒”提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：(1)收集篩選高效價(jià)兔和人HP免疫血清，鹽析法和層析法分離純化得到HP多克隆抗體。(2)采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標(biāo)記純化的特異性人抗Hp抗體，制成金標(biāo)抗體。(3)將純化的特異性兔抗HP抗體固定于硝酸纖維素膜上，制成斑點(diǎn)金標(biāo)免疫反應(yīng)模板。分別取糞便、胃液、血清與反應(yīng)模板

2、結(jié)合，然后與金標(biāo)記的人抗HP抗體于37℃進(jìn)行反應(yīng)，陽(yáng)性結(jié)果呈現(xiàn)肉眼可見的紅斑。 結(jié)果：(1)斑點(diǎn)金免疫法對(duì)比測(cè)定42例患者的胃液、糞便及血清，其中胃液斑點(diǎn)金法測(cè)定陽(yáng)性26例，陰性16例，陽(yáng)性率61.9％，準(zhǔn)確性69.04％；糞便斑點(diǎn)金法測(cè)定陽(yáng)性27例，陰性15例，陽(yáng)性率64.29％，準(zhǔn)確性57.14％；血清斑點(diǎn)金法測(cè)定陽(yáng)性10例，陰性32例，陽(yáng)性率23.81％，準(zhǔn)確性40.48％。(2)胃液斑點(diǎn)金法與尿素酶試驗(yàn)對(duì)比檢測(cè)60例患者

3、，其診斷符合率61.67％。(3)胃液斑點(diǎn)金法與血清學(xué)HP抗體檢測(cè)對(duì)比測(cè)定60例患者，其診斷符合率65％。 結(jié)論：(1)斑點(diǎn)金法檢測(cè)胃液HP抗原診斷HP感染是可行的。(2)斑點(diǎn)金法檢測(cè)胃液HP抗原的準(zhǔn)確性高于糞便和血清HP抗原的檢測(cè)。(3)斑點(diǎn)金法檢測(cè)糞便HP抗原的陽(yáng)性率雖然高于胃液和血清HP抗原的檢測(cè)，但是糞便HP抗原檢測(cè)的假陽(yáng)性率也高。(4)斑點(diǎn)金法檢測(cè)HP抗原具有操作簡(jiǎn)便、快速，無(wú)創(chuàng)傷，結(jié)果判斷無(wú)須依靠任何儀器，還可以避免