多肽Urocortin對(duì)大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶作用的研究.pdf

1、Urocortin(Ucn)是促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(corticotropin-releasingfactor，CRF)肽類家族中的新成員。自從被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，Ucn已被證實(shí)在心血管系統(tǒng)的功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用。但其作用機(jī)制至今仍不十分明確。 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin-convertingenzyme，ACE)是腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensinsystem，RAS)中的重要組成部分。AC

2、E通過(guò)將血管緊張素Ⅰ(angiotensinⅠ，AngⅠ)轉(zhuǎn)化為強(qiáng)縮血管物質(zhì)血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)及降解舒血管物質(zhì)緩激肽(bradykinin，BK)從而在血壓的調(diào)節(jié)方面起著極為重要的作用。 本研究探討了Ucn對(duì)于大鼠ACE活性及ACEmRNA表達(dá)的影響，進(jìn)一步拓展對(duì)Ucn血壓調(diào)節(jié)作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)。 本研究?jī)?nèi)容包括以下三部分，概述如下：1.急性給藥后Ucn對(duì)Sprague-Dawley(SD)大

3、鼠ACE水平及ACEmRNA表達(dá)的影響 采用尾靜脈注射給藥的方法，給予SD大鼠不同濃度的Ucn1小時(shí)后從胸主動(dòng)脈取血測(cè)血清ACE水平；取大鼠胸主動(dòng)脈及肺測(cè)定組織ACE水平。并應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)組織ACEmRNA表達(dá)情況。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Ucn可以濃度依賴性地降低血清ACE水平，而對(duì)組織ACE水平及組織ACEmRNA表達(dá)無(wú)明顯作用。且Ucn對(duì)血清ACE的作用被證明是通過(guò)CRF受體(CRFreceptor,CRFR)及

4、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellularsignal-regulatedkinase1/2，ERK1/2)通路來(lái)發(fā)揮的。 2.亞急性給藥后Ucn對(duì)SD大鼠ACE水平及ACEmRNA表達(dá)的影響采用尾靜脈注射給藥的方法，連續(xù)給予SD大鼠不同濃度的Ucn3天后從胸主動(dòng)脈取血測(cè)血清ACE水平；取大鼠胸主動(dòng)脈及肺測(cè)定組織ACE水平。應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)組織ACEmRNA表達(dá)情況。并采用原代培養(yǎng)的大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(rat

5、aorticendothelialcells，RAECs)，給予不同濃度的Ucn，孵育72h。應(yīng)用免疫熒光染色的方法，在激光共聚焦顯微鏡下觀測(cè)ACE熒光強(qiáng)弱并測(cè)定其熒光值(fluorescenceintensity,FI)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：亞急性給藥后Ucn可以濃度依賴性地降低血清ACE水平，同時(shí)可以濃度依賴性地升高組織ACE水平及組織ACEmRNA表達(dá)。給予Ucn72h后，RAECs的ACEFI值明顯升高，且Ucn對(duì)RAECs

6、ACE含量的升高作用呈濃度依賴性。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明，亞急性給藥后Ucn對(duì)大鼠ACE的影響是通過(guò)CRFR及ERK1/2通路發(fā)揮作用的。 3.慢性給藥后Ucn對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverats，SHR)ACE水平及ACEmRNA表達(dá)的影響 連續(xù)尾靜脈注射給予不同濃度的Ucn8周，每周測(cè)量1次SHR尾動(dòng)脈收縮壓(systolicbloodpressure，SBP)。8周后，從胸主動(dòng)脈取

7、血測(cè)血清ACE水平；取大鼠胸主動(dòng)脈及肺測(cè)定組織ACE水平；并應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)胸主動(dòng)脈及肺ACEmRNA表達(dá)情況。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：慢性給藥后Ucn降低血清ACE水平，但可以濃度依賴性地升高胸主動(dòng)脈及肺的ACE水平及組織ACEmRNA表達(dá)。同時(shí)，血清 ACE與SBP水平呈明顯正相關(guān)。 綜上所述，在體試驗(yàn)及離體試驗(yàn)均顯示，Ucn可以明顯影響大鼠ACE的水平，該影響是通過(guò)CRFR及ERK1/2通路發(fā)揮作用的。而給