生存素反義寡核酸在胃癌細(xì)胞系中對(duì)表阿霉素的增敏性及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究.pdf

1、目的：近年來有研究表明經(jīng)相同的化療過程后，survlvin表達(dá)陰性的患者臨床癥狀及病理表現(xiàn)緩解率均高于survivin表達(dá)陽性的患者，這說明survivin基因的表達(dá)可能與腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性有關(guān)，但其具體機(jī)制目前還未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建survivin反義核酸，研究其在胃癌化療中對(duì)表阿霉素的增敏作用及可能的作用機(jī)制 方法：設(shè)計(jì)并構(gòu)建survivin反義寡核酸鏈（ASODN）及正義寡核酸對(duì)照鏈，采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染胃癌SGC-

2、7901細(xì)胞，MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染組細(xì)胞抑制率并篩選出適宜濃度，不同濃度表阿霉素處理胃癌SGC-7901細(xì)胞，MTT法檢查表阿霉素對(duì)其生長(zhǎng)抑制作用，篩選出對(duì)SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率較低的4組濃度做為待測(cè)濃度，將2種因素聯(lián)合作用于SGC-7901細(xì)胞，Western-blot法檢查survivin蛋白表達(dá)情況，MTT法檢查表阿霉素對(duì)其抑制率，流式細(xì)胞儀檢查細(xì)胞周期，Annexin V-FITC法檢查細(xì)胞凋亡情況，RT-PCR法檢查bcl

3、-2、SMac mRNA表達(dá)情況。 結(jié)果：經(jīng)200nm/L ASODN反義核酸處理后的SGC-7901細(xì)胞對(duì)表阿霉素的敏感性明顯增加：MTT法示轉(zhuǎn)染后細(xì)胞經(jīng)表阿霉素作用24h后，抑制率較單獨(dú)使用表阿霉素的未轉(zhuǎn)染組明顯提高（P<0.05，q>1.15），流式細(xì)胞儀檢查示聯(lián)合作用組使細(xì)胞G2/M期細(xì)胞數(shù)較單獨(dú)使用表阿霉素組明顯增多：western-blot檢查示轉(zhuǎn)染后survivin蛋白表達(dá)水平顯著降低，Annexin V-FITC