雨蛙素誘導(dǎo)胰腺炎模型的探索及脂肪因子預(yù)測(cè)持續(xù)性器官衰竭的臨床初步研究.pdf

1、胰腺炎的研究模型眾多，其中雨蛙素腹腔注射法由于易于誘導(dǎo)、非侵襲性操作、重復(fù)性好，并且其胰腺的組織病理學(xué)表現(xiàn)接近于人體的急性胰腺炎特征而被廣泛應(yīng)用。研究中經(jīng)常需要嚴(yán)重程度不同的胰腺炎模型，但至今尚無(wú)一個(gè)呈遞進(jìn)式變化的胰腺炎模型，因此有必要對(duì)雨蛙素誘導(dǎo)胰腺炎模型進(jìn)行深入探索，本研究擬通過(guò)不同劑量的雨蛙素刺激來(lái)觀察胰腺炎嚴(yán)重程度的變化。
　　除了常見(jiàn)的炎癥物質(zhì)如IL-6、IL-8、IL-10、CRP等參與到不同嚴(yán)重程度胰腺炎的發(fā)生進(jìn)展當(dāng)

2、中，近些年來(lái)，脂肪因子作為一種調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的物質(zhì)與胰腺炎的發(fā)病密切相關(guān)。但是目前尚無(wú)有關(guān)多種脂肪因子和胰腺炎嚴(yán)重程度的臨床研究，本研究擬探索脂肪因子變化與胰腺炎嚴(yán)重程度的關(guān)系，并將這些變化與APACHE-II評(píng)分進(jìn)行比較，研究脂肪因子預(yù)測(cè)持續(xù)性器官衰竭的特異性和敏感性，為臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
　　研究一小鼠胰腺炎模型的探索和改進(jìn)
　　目的:
　　建立同一病因所致的輕癥和重癥胰腺炎。
　　方法:
　　采用兩種方

3、法建立雨蛙素誘導(dǎo)的小鼠胰腺炎模型。1.雨蛙素濃度相同而注射次數(shù)不同建立胰腺炎模型，采用C57小鼠以雨蛙素50ug/kg分別間斷腹腔注射3、6、9、12次誘導(dǎo)；2.通過(guò)不同的雨蛙素濃度統(tǒng)一注射12次誘導(dǎo)，以雨蛙素10ug/kg、50ug/kg、250ug/kg三個(gè)濃度統(tǒng)一間斷腹腔注射12次來(lái)誘導(dǎo)，觀察血清淀粉酶和脂肪酶、胰腺干濕重、胰腺組織HE染色及組織病理學(xué)評(píng)分、肺臟組織HE染色。
　　結(jié)果:
　　常規(guī)雨蛙素劑量（50ug/

4、kg）分別腹腔注射3、6、9、12次時(shí)，實(shí)驗(yàn)組血清淀粉酶明顯高于對(duì)照組（P<0.05），并在9次時(shí)達(dá)到高峰（25966.67±3787.02 U/L）；胰腺干濕重在實(shí)驗(yàn)組中顯著高于對(duì)照組（P<0.05），在注射6次時(shí)達(dá)到峰值（81.13±1.03％）；胰腺組織HE染色光學(xué)顯微鏡下顯示注射3次時(shí)胰腺局部?jī)H有些許水腫和少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，6次時(shí)可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，明顯的水腫，9次時(shí)胰腺小葉邊緣出現(xiàn)少量的壞死灶，12次可見(jiàn)到大范圍的腺泡壞死灶

5、（胰腺組織病理評(píng)分8.20±0.84），鏡下表現(xiàn)出壞死性胰腺炎改變。雨蛙素腹腔注射次數(shù)相同（12次），分別以10ug/kg，50ug/kg，250ug/kg濃度處理各組小鼠，50ug/kg組其血清淀粉酶和脂肪酶、胰腺干濕重均達(dá)到最高值，顯著高于對(duì)照組（P<0.05），而胰腺組織HE染色鏡下顯示10ug/kg組以局部的炎細(xì)胞浸潤(rùn)和輕度的水腫為主，50ug/kg已前述，250ug/kg組主要出現(xiàn)片狀的胰腺腺泡壞死，部分小葉結(jié)構(gòu)缺失。

6、　　結(jié)論:
　　在一定范圍內(nèi)隨著雨蛙素劑量的增加，胰腺炎的嚴(yán)重程度是逐漸增加的。在C57小鼠體內(nèi)，常規(guī)雨蛙素劑量（50 ug/kg）間斷腹腔注射6次可誘發(fā)出急性水腫型胰腺炎，而12次可誘發(fā)出壞死性胰腺炎改變。
　　研究二脂肪因子預(yù)測(cè)胰腺炎持續(xù)性器官衰竭的臨床初步研究
　　目的:
　　本課題擬觀察胰腺炎患者發(fā)病早期血清脂肪因子變化與胰腺炎嚴(yán)重程度的關(guān)系，研究脂肪因子預(yù)測(cè)持續(xù)性器官衰竭的特異性和敏感性，為臨床應(yīng)用奠定

7、基礎(chǔ)。
　　方法:
　　從前期注冊(cè)的一個(gè)前瞻性隊(duì)列研究中提取符合標(biāo)準(zhǔn)的90名連續(xù)胰腺炎患者，血清脂聯(lián)素、抵抗素和瘦素的測(cè)定分別采用MILLIPLEX? MAP和ELISA方法檢測(cè)，并且比較不同嚴(yán)重程度患者間三個(gè)脂肪因子的含量變化。比較各組APACHE-II評(píng)分和脂肪因子對(duì)持續(xù)性器官衰竭的預(yù)測(cè)價(jià)值。
　　結(jié)果:
　　抵抗素在胰腺炎合并持續(xù)性器官衰竭患者中顯著增加，與不合并者相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在超重和非超重AP

8、亞組中結(jié)果與上述類似。瘦素和脂聯(lián)素在胰腺炎合并持續(xù)性器官衰竭各亞組中都有所增加，但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　抵抗素與APACHE-II評(píng)分對(duì)胰腺炎患者合并持續(xù)性器官衰竭的預(yù)測(cè)能力接近（AUC分別是0.72、0.75，p=0.66）；在超重與非超重各AP亞組中，抵抗素均顯示出同樣的準(zhǔn)確性，在超重人群中曲線下面積是（0.69 vs0.66，p=0.82），在非超重人群中曲線下面積是（0.76 vs0.87，p=0.39）。此外，瘦素與