聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1依賴的細胞死亡機制在腸缺血再灌注損傷中作用的實驗研究.pdf

1、目的：研究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)依賴的細胞死亡機制在大鼠腸缺血再灌注損傷中的作用。 方法：選取雄性Sprague-Dawley大鼠33只，隨機分配到以下5組：假手術(shù)組(Sham，n=5)：腸缺血再灌注組(n=7/group)，I/R1組(腸缺血時間為15 min)，Drug1組(腸缺血時間為15 min，術(shù)前給3-aminobenzamide，30mg/kg)，I/R2組(腸缺血時間為30 min)，Drug

2、2組(腸缺血時間為30 min，術(shù)前給3-aminobenzamide，30 mg/kg)。動物麻醉成功后，通過阻斷腹腔干和腸系膜上動脈后恢復(fù)血運，制作鼠腸缺血再灌注模型。按不同分組要求缺血時間分別為15 min和30 min，再灌注2小時后，處死動物取材，分別作HE染色、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)的免疫組化染色，用TUNEL方法檢測組織細胞凋亡情況，用Western Blot檢測凋亡早期信號聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)片

3、段p85和凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)的表達情況。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準差(means±SD)表示，組間比較采用One-Way ANOVA和Kruskal-Wallis秩和檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義，采用SPSS 10.0軟件包進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：I/R1組腸損傷程度、PAR陽性表達率、細胞凋亡率和凋亡早期信號PARP-1p85片段、AIF表達程度均較Sham組顯著增高(P<0.05)；I/R2組腸損傷程度、PAR陽性表達率均較

4、Sham組和I/R1組顯著增高(P<0.05)。應(yīng)用PARP-1抑制劑3-AB后，Drug1組腸損傷程度、PAR表達陽性率、細胞凋亡率和凋亡早期信號PARP-1 p85片段、AIF表達程度均較I/R1組顯著降低(P<0.05)。Drug2組腸損傷程度、PAR表達陽性率均較I/R2組顯著降低(P<0.05)。結(jié)論：(1)腸I/R會導(dǎo)致PARP-1激活程度明顯增加，通過細胞凋亡和細胞壞死兩種死亡方式來介導(dǎo)組織損傷，PARP-1激活程度與這兩