人參多糖對豬乳外胞體和仔豬血清中免疫相關(guān)miRNA的影響.pdf

1、前期研究表明，人參復(fù)合多糖對懷孕母豬具有免疫調(diào)節(jié)作用，并通過母體效應(yīng)影響其仔豬的生長和免疫機能。乳外胞體是近來發(fā)現(xiàn)的乳中囊泡結(jié)構(gòu)，其中含有具有免疫調(diào)控作用的miRNA分子。本文擬從豬乳外胞體的角度，探討人參復(fù)合多糖是否通過調(diào)節(jié)豬乳中免疫相關(guān)miRNA來影響仔豬的生長及免疫調(diào)節(jié)作用，分析豬乳外胞體和仔豬血清miRNA的階段表達(dá)規(guī)律。
　　試驗選取胎次相近、孕期90天的健康大白母豬，隨機分為2組，每組各10頭。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗

2、組在基礎(chǔ)日糧中添加400mg/kg的人參復(fù)合多糖，飼喂試驗到仔豬斷奶前結(jié)束。仔豬出生后24h內(nèi)進行稱重，記錄每頭母豬產(chǎn)仔的個體重和窩重，以及每頭母豬的產(chǎn)仔數(shù)、活仔數(shù)、弱仔數(shù)、死豬數(shù)、僵豬數(shù)。在仔豬14日齡時，對仔豬進行稱重，記錄仔豬體重。并采集母豬哺育期第1、3、7、14天的豬乳，同時在仔豬前腔靜脈采集仔豬出生第1、3、7、14天的血，分離血清。采用ELISA試劑盒測定豬乳及血清中免疫相關(guān)指標(biāo)，如IgG、IgA、IL-2、IL-6等的含

3、量，并用qPCR分別測定對照組和試驗組豬乳及血清免疫相關(guān)miRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果顯示：
　?。?）人參復(fù)合多糖對母豬的產(chǎn)仔數(shù)、活仔數(shù)、弱仔數(shù)、死豬數(shù)、僵豬數(shù)等均無顯著性影響（p>0.05）；試驗組在第14天時仔豬增重顯著高于對照組（p<0.05），結(jié)果表明人參復(fù)合多糖對仔豬的生長具有一定的促進作用。
　?。?）人參復(fù)合多糖可以顯著提高母豬泌乳第3天的IgA的表達(dá)水平（p<0.05）；顯著提高母豬泌乳第1天和第3

4、天的IgG、IL-2、IL-6的表達(dá)水平（p<0.05）；顯著提高仔豬出生第3天的血清IgA的表達(dá)水平（p<0.05）；以及顯著提高仔豬出生第1天和第3天的血清IgG、IL-2、IL-6表達(dá)水平（p<0.05）。通過線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，母豬乳和仔豬血清IgG、IgA的表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系（p<0.05），母體效應(yīng)顯著。
　?。?）通過熒光定量分析發(fā)現(xiàn)，豬乳外胞體免疫相關(guān)miRNA的表達(dá)水平大部分為泌乳第1天開始增加，第3天達(dá)到最高，

5、第7天和14天下調(diào)；而仔豬血清免疫相關(guān)miRNA的表達(dá)水平大部分為第1天表達(dá)量最高，在第3天有所下調(diào)，第7天和14天基本保持穩(wěn)定，且豬乳外胞體中的miRNA（除miR-30a-5p外）表達(dá)小于仔豬血清中的水平，相差10~100倍。通過線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，母豬乳外胞體和仔豬血清中miRNA的表達(dá)水平呈正相關(guān)關(guān)系（p<0.05），富集效應(yīng)明顯。
　?。?）通過豬乳外胞體和仔豬血清免疫相關(guān)miRNA對比發(fā)現(xiàn)，人參復(fù)合多糖對豬乳和仔豬血清免

6、疫相關(guān)miRNA具有不同的調(diào)節(jié)作用。其中泌乳第3天時，豬乳外胞體和仔豬血清中的miR-193a-3p、miR-320、miR-30a-5p均顯著低于對照組（p<0.05），在第1、7、14天也都有下調(diào)的趨勢。泌乳第3天時，豬乳外胞體中的miR-92a和miR-140-3p有明顯的上調(diào)作用，其中 miR-92a上調(diào)差異顯著（p<0.05），且多糖組豬乳外胞體和仔豬血清中的miR-92a和 miR-140-3p表達(dá)量在其他的不同階段也有上調(diào)