瘢痕組織TGF-β表達(dá)及與黑素細(xì)胞影響關(guān)系的研究.pdf

1、研究目的: 在病理性瘢痕的形成過(guò)程中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）發(fā)揮著極其重要的作用，它可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖和分泌大量的膠原，并導(dǎo)致膠原沉積和抑制其降解，延緩上皮化過(guò)程，促使病理性瘢痕的產(chǎn)生。 已有研究表明，抑制TGF-β的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)就能有效抑制TGF-β的生物學(xué)效應(yīng)，而TGF-β的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程存在有多個(gè)可調(diào)控點(diǎn)，不同的蛋白分子參與其中。為此，本研究首先采用細(xì)胞和組織免疫化學(xué)的方法，檢測(cè)TGF-β及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的

2、Smad3、P-Smad2/3等蛋白分子在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中的表達(dá)差異，并進(jìn)行比較分析，以希望找到此信號(hào)通路中最為關(guān)鍵的調(diào)控點(diǎn)，為病理性瘢痕的機(jī)制和治療研究，提供一個(gè)新的切入點(diǎn)。 色素對(duì)病理性瘢痕形成的影響，一直以來(lái)報(bào)道甚少。但病理性瘢痕在不同膚色人群中的發(fā)生率差異明顯，在個(gè)體，黑素細(xì)胞分布情況不同的部位發(fā)生率也不一樣。本實(shí)驗(yàn)建立了人黑素細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的體外共培養(yǎng)模型，觀察共培養(yǎng)條件下的成纖維細(xì)胞，其在生長(zhǎng)增

3、殖、膠原分泌、TGF-β1及其胞內(nèi)P-Smad2/3表達(dá)等方面的改變情況，為黑素細(xì)胞和瘢痕增生之間關(guān)系的研究，提供了一個(gè)新的思路。 研究方法: 1、用細(xì)胞免疫化學(xué)和熒光化學(xué)的方法檢測(cè)TGF-b1和Smad3在瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞內(nèi)的定位與表達(dá)情況。 2、用組織免疫化學(xué)技術(shù)檢測(cè)TGF-b1、Smad3和P-Smad2/3在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中的表達(dá)差異性，并統(tǒng)計(jì)分析。 3、建立人黑素細(xì)胞和人成

4、纖維細(xì)胞的體外共培養(yǎng)模型，并用MTT、RT-PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)等技術(shù)檢測(cè)共培養(yǎng)條件下的成纖維細(xì)胞，其生長(zhǎng)和增殖能力、膠原的分泌、TGF-b1和P-Smad2/3表達(dá)水平的變化情況。 研究結(jié)果: 1、可見(jiàn)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞內(nèi)TGF-b1和Smad3皆為陽(yáng)性表達(dá)，均主要存在于細(xì)胞漿中。 2、可見(jiàn)TGF-b1、Smad3和P-Smad2/3在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織中有不同程度的表達(dá)，表達(dá)部位也不相同。

5、 3、可發(fā)現(xiàn)與黑素細(xì)胞共培養(yǎng)后的成纖維細(xì)胞，在增殖能力、膠原分泌、TGF-b1及P-Smad2/3的表達(dá)水平上都有顯著提高。 研究結(jié)論: 1、瘢痕疙瘩的成纖維細(xì)胞可檢測(cè)到TGF-b1和Smad3的陽(yáng)性表達(dá)狀態(tài)。 2、P-Smad2/3在不同組織中的表達(dá)水平有顯著差異，一定程度上能反映瘢痕的病理性水平；TGF-b1在病理性瘢痕中表達(dá)量高，在正常皮膚中表達(dá)量很低。 3、黑素細(xì)胞可刺激成纖維細(xì)胞增殖和膠原的