miR146b及miR-503在博來霉素誘導的小鼠肺纖維化中的表達及作用初步研究.pdf

1、目的:探討microRNA-146b（miR-146b）及microRNA-503（miR-503）在博來霉素所致肺纖維化(bleomycin-induced pulmonary fibrosis)小鼠肺組織中的表達及其可能的作用機制。
　　方法:①將50只C57BL/6小鼠隨機分為三組:對照組、博來霉素肺纖維化組（模型組）、硼替佐米干預組（干預組）;對照組予以氣管內灌注生理鹽水，造模后1周予以腹腔注射生理鹽水(0.1ml);模型

2、組則氣管內滴注博來霉素溶液(3.5mg/kg)，造模后1周予以腹腔注射生理鹽水(0.1ml)，干預組給予氣管內滴注博來霉素溶液（方法劑量同模型組），造模后1周予以腹腔注射硼替佐米溶液(120ug/kg，0.1ml);分別于造模后第3周、第4周處死小鼠。②采用肺組織蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining，HE染色)、masson三色染色法及纖維化相關基因檢測等方法驗證纖維化模型是否構建成功。③提取肺組織總

3、核糖核酸(Ribonucleic Acid，RNA)，檢測各組小鼠肺組織中miR-146b及miR-503的表達。④利用生物信息學網(wǎng)站(TargetScan，PicTar，MiRanda)及生物醫(yī)學檢索網(wǎng)站PubMed預測miR-146b及miR-503纖維化相關靶基因。⑤利用實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）及蛋白質印記(Western-blot)分析所預

4、測的靶基因的表達。
　　結果:①成功構建博來霉素誘導的小鼠肺纖維化小鼠模型。②miR-146b在模型組小鼠中表達較對照組明顯上調;miR-503在模型組小鼠中表達較對照組明顯下調(P＜0.01)。③通過生物信息學預測miR-146b纖維化相關靶基因有irak、siah2、klf4、mmp16、notchl及fox03，其中在模型組小鼠中fox03，siah2表達下調(P＜0.01)，與miR-146b表達趨勢相反。④通過生物信息學