唾液酸轉移酶ST8Sia VI在乳腺癌細胞轉移過程中的作用及其分子機制的初步研究.pdf

1、腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉移與糖鏈的表達密切相關,腫瘤細胞表面唾液酸化糖鏈的結構和數(shù)量的變化會引起腫瘤細胞運動黏附、遷移侵襲、增殖凋亡等多種功能的改變。唾液酸化的糖鏈是由一種或多種唾液酸轉移酶催化合成的,α2,8-唾液酸轉移酶Ⅵ(ST8SSia Ⅵ)是鼠的唾液酸轉移酶家族20個成員之一,是第一個被報道的催化O-聚糖唾液酸化的α2,8-唾液酸轉移酶。ST8Sia Ⅵ對糖蛋白和糖鞘脂的糖基非還原末端的NeuAcα2,3(6)Gal序列有催化活性

2、,該酶催化底物形成NeuAcα2,8NeuAc的二聚唾液酸化結構。2005年人的STSSia Ⅵ糖基轉移酶也被克隆出來,但是關于STSSia Ⅵ功能的研究很少,其在細胞的生理和病理過程中的作用國內外均無相關報道。本文旨在研究STSSia Ⅵ在乳腺癌細胞轉移過程中的作用,并探討其作用機制,為闡明細胞膜上糖蛋白的二聚唾液酸化在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中的重要作用提供理論依據(jù),同時為腫瘤的診斷和治療開辟新途徑。
　　 本實驗以小鼠乳腺癌細

3、胞4T1和67NR為研究對象。首先,構建了穩(wěn)定的ST8Sia Ⅵ過表達的4T1和67NR細胞株,在體外探討了ST8Sia Ⅵ對腫瘤細胞行為學方面的影響。MTT法實驗表明,STSSia Ⅵ對4T1和67NR細胞的生長無影響;Transwell小室實驗證明STSSia Ⅵ明顯促進4T1和67NR細胞的遷移能力。這些實驗結果表明STSSia Ⅵ的過表達能夠提高小鼠乳腺癌細胞的惡性程度,對于4T1細胞尤其作用尤其顯著。實驗結果證實ST8Sia

4、Ⅵ在乳腺癌細胞轉移過程中發(fā)揮重要作用。
　　 在4T1細胞中尋找STSSia Ⅵ促進乳腺癌細胞轉移相關靶蛋白或信號通路,發(fā)現(xiàn)ST8Sia Ⅵ過表達對MAPK通路的激活尤為顯著。實驗發(fā)現(xiàn)細胞因子IL-6可以部分通過gp130-JAK通路來激活MAPK通路,但是gp130受體和IL-6R受體不是ST8Sia Ⅵ的靶蛋白。實驗發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)MAPK通路在ST8Sia Ⅵ促進乳腺癌細胞轉移中起關鍵作用,當抑制MAPK的活性后,ST8Sia Ⅵ

5、增強乳腺癌細胞遷移能的作用消失,表明4T1中ST8Sia Ⅵ是通過MAPK信號通路依賴的機制來影響細胞的遷移能力,其中ST8Sia Ⅵ的糖基化修飾靶蛋白需要進一步研究。
　　 綜上所述,唾液酸轉移酶ST8Sia Ⅵ能夠促進小鼠乳腺癌細胞的遷移能力,初步實驗結果表明,ST8Sia Ⅵ主要通過激活MAPK信號通路促進乳腺癌4T1細胞轉移,IL-6和gp130信號通路在其中起到重要作用,但不是ST8Sia Ⅵ的修飾靶蛋白,靶蛋白有待進