褪黑素對實驗性肺纖維化大鼠P38MAPK表達的研究.pdf

1、目的:
　　 肺間質纖維化（pulmonary fibrosis）是種由多種原因引起的肺部疾病，目前的治療手段欠佳，加深對肺纖維化機制的研究，并尋找新的治療策略迫在眉睫。已有文獻證實，在博來霉素(bleomycin，BLM)誘導的肺纖維化動物模型中，氧化應激扮演了重要角色，P38絲裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinase，P38MAPK)通路可以被氧化應激信號激活，而褪黑素(mel

2、atonin，MT)具有強大的抗氧化作用，因此本實驗設計觀察MT對BLM致肺纖維化大鼠P38MAPK表達的影響，為防治肺間質纖維化找到新方法。
　　 材料和方法:
　　 健康雌性SD大鼠45只，隨機分為3組，每組15只，分別為模型組，干預組及對照組。模型組和干預組均一次性氣管內注入BLM(5mg/kg)，對照組氣管注入同體積生理鹽水。干預組于造模前2天腹腔注射褪黑素(4mg/kg.d-1)，而模型組和對照組給予腹腔注射同

3、體積生理鹽水。每組分別于造模后第7，14，28天各隨機處死5只大鼠。左肺立即放于凍存管中-80℃保存，供PCR方法檢測，右肺置于10％甲醛固定，供HE染色、Masson三聯(lián)染色和免疫組織化學方法檢查。大鼠肺組織采用HE染色和Masson染色了解肺泡炎和肺纖維化的情況，用免疫組織化學方法檢測大鼠肺組織P38MAPK和FN的表達情況；用逆轉錄-聚合酶鏈半定量（RT-PCR）方法檢測肺組織P38MAPKmRNA表達的水平。
　　 結果

4、:
　　 病理檢查結果顯示：模型組第7天一部分肺泡腔變小或者塌陷、肺間隔明顯變寬，大量炎癥細胞浸潤，炎癥改變明顯；第14天炎癥細胞減少，出現(xiàn)少量膠原沉積；第28天肺間質大量膠原沉積，纖維化改變明顯。肺組織中P38MAPK(蛋白和mRNA)和FN(蛋白)在對照組表達較少，而模型組在第7天表達增強，第14天明顯增強，達到高峰，第28天較第14天開始減弱；干預組在各時間點上升幅度均低于模型組，但仍強于對照組，數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義(P＜