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文檔簡介
1、目的: 觀察β-欖香烯對(duì)四氯化碳肝纖維化大鼠TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、MMP-2、MMP-9mRNA表達(dá)的影響,從而探討β欖香烯抗肝纖維化的作用機(jī)制。
方法: 采用CCl4皮下注射誘導(dǎo)Wistar雄性大鼠肝纖維化模型,用β-欖香烯0.1ml/100g劑量每天腹腔注射8周后,用蘇木精-伊紅染色和膠原纖維(Masson)染色觀察大鼠肝臟病理變化,酶動(dòng)力法檢測(cè)肝功能,SP免疫組化法檢測(cè)肝組織中α-肌動(dòng)蛋白(α-SMA
2、)、轉(zhuǎn)化生長因子β1 (TGF-β1)、Ⅰ型膠原(Col-Ⅰ)表達(dá)的變化,樣本堿水解法檢測(cè)肝組織中羥脯氨酸(HYP)的含量.。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)測(cè)定大鼠肝組織中MMP-2、MMP-9mRNA表達(dá)量的積分光密度比值(V/B),以V/B值反映各組織中MMP-2、MMP-9 mRNA表達(dá)量的高低。
結(jié)果:在治療給藥8周后,正常組、模型組、對(duì)照組、治療組肝組織膠原纖維面積百分比分別為1.22±0.24、7.4
3、7±0.81、5.57±0.78、4.33±0.48,治療組vs模型組(P<0.01),治療組vs對(duì)照組(P<0.01),肝組織纖維化程度分級(jí)較模型組逐漸好轉(zhuǎn),膠原纖維所占面積顯著縮小;模型組和治療組酶學(xué)指標(biāo)ALT、AST、ALB分別為254.88±70.18 vs 208.47±85.70;414.42±138.11 vs 330.92±107.40;26.54±1.59 vs 28.47±1.11,P<0.05;肝組織中測(cè)得的羥脯氨
4、酸OD比值分別為0.162±0.048、0.410±0.145、0.273±0.088、0.186±0.120,治療組vs模型組(P<0.01);I型膠原陽性面積比分別為3.022±0.553、9.998±1.431、7.554±0.914、4.587±1.008,治療組vs模型組(P<0.01),治療組vs對(duì)照組(P<0.01);α-SMA在肝組織中的表達(dá)分別為0.968±0.281、5.605±1.315、4.914±0.893、3
5、.172±0.542,治療組vs模型組(P<0.01);TGF-β1在肝組織中的表達(dá)分別為1.026±0.208、5.653±0.9、4.702±0.627、2.868±0.554,治療組vs模型組(P<0.01),治療組vs對(duì)照組(P<0.05).RT-PCR測(cè)得的各組肝組織中MMP-2mRNA積分光密度比值分別為(1.0124±0.1257、1.9353±0.1447、1.5885±0.2963、1.3205±0.3875,模型組v
6、s 正常組P<0.01;模型組vs 治療組P<0.05);MMP-9mRNA積分光密度比值分別為(0.1684±0.0745、0.5137±0.0918、0.3833±0.1605、0.3178±0.1204,模型組vs 正常組P<0.01;模型組vs 治療組P<0.05)。
結(jié)論:β-欖香烯對(duì)四氯化碳肝纖維化大鼠具有拮抗作用,能通過降低肝纖維化進(jìn)程中TGF-β1、α-SMA、COL-I、MMP-2和MMP-9mRNA的表
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