玉米醇溶蛋白亞微粒的制備及組織分布研究.pdf

1、近年來(lái)微粒載藥系統(tǒng)的研究是藥劑學(xué)的一大熱點(diǎn)，而載體材料則是影響載藥微粒性質(zhì)特點(diǎn)的關(guān)鍵。合成高分子材料如聚乳酸(PLA)、聚乳酸．乙醇酸共聚物(PLGA)由于其優(yōu)良的生物降解性及物理化學(xué)性質(zhì)而備受研究者的青睞，但是PLGA易發(fā)生骨架溶蝕，會(huì)使環(huán)境的pH值降低，對(duì)蛋白質(zhì)類(lèi)敏感性治療物質(zhì)將產(chǎn)生不利影響。而天然高分子物質(zhì)，如明膠、白蛋白、酪蛋白等也存在水性環(huán)境中溶解迅速，釋藥速度較快的缺點(diǎn)。玉米醇溶蛋白是玉米中的疏水蛋白，屬于天然高分子物質(zhì)，具

2、有良好的生物相容性和生物降解性，作為一種生物可降解材料有著廣闊的應(yīng)用前景，目前國(guó)內(nèi)玉米醇溶蛋白的研究尚處于初級(jí)階段。 5-氟尿嘧啶(5-fluororacil，5-FU)為嘧啶類(lèi)抗代謝類(lèi)藥物，其抗瘤譜比較廣，與常用抗腫瘤藥無(wú)交叉耐藥現(xiàn)象，是一種廣泛應(yīng)用于臨床的抗腫瘤藥，主要用于胃癌、腸癌和肝癌的治療。5-FU的療效雖好，但存在骨髓抑制引起的白細(xì)胞、血小板減少，及食欲不振、惡心、嘔吐和腹瀉等副反應(yīng)。將其制成具有一定靶向和緩釋作用的

3、毫微粒，可以達(dá)到降低氟尿嘧啶毒性，延長(zhǎng)藥物的半衰期，提高生物利用度，減少給藥次數(shù)的目的。布洛芬(Ibuprofen)又名異丁苯丙酸，是一種療效確切、不良反應(yīng)少、安全性高的烷基丙酸類(lèi)解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥。布洛芬溶解性差，半衰期很短，一般為1.5～2h，為了維持有效的血藥濃度需要頻繁給藥，而且口服長(zhǎng)期用藥可導(dǎo)致消化不良、惡心、腹痛、燒心等副作用，因此多以緩釋制劑用于臨床，國(guó)內(nèi)外有大量文獻(xiàn)報(bào)道將布洛芬制成微粒給藥系統(tǒng)以期達(dá)到緩釋效果。 本課

4、題以玉米醇溶蛋白為載體材料，分別以溶解性能不同的兩種藥物5-FU和布洛芬為模型藥物，采用相分離法制備了玉米醇溶蛋白亞微粒，考察了亞微粒的物理化學(xué)性質(zhì)及體外釋藥特點(diǎn)；將羅丹明B熒光染色劑用玉米醇溶蛋白包裹后，采用熒光分光光度法考察了玉米醇溶蛋白亞微粒在小鼠體內(nèi)的分布特征，為玉米醇溶蛋白亞微粒的進(jìn)一步應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。課題主要研究方法及結(jié)果如下： 1.利用高速離心法分離亞微粒和游離藥物，建立了采用紫外分光光度法測(cè)定包封率的

5、方法。 2.對(duì)5-FU玉米醇溶蛋白亞微粒的制備工藝和處方進(jìn)行了研究。通過(guò)單因素試驗(yàn)考察了玉米醇溶蛋白．藥物的質(zhì)量比、玉米醇溶蛋白的濃度、水溶液的pH值、攪拌時(shí)間、攪拌速度及乙醇的最終濃度等因素對(duì)5-FU玉米醇溶蛋白亞微粒包封率的影響。在此基礎(chǔ)上采用均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化5-FU亞微粒的制備工藝，以包封率為指標(biāo)，得到5-FU亞微粒的優(yōu)化處方。 3.5-FU玉米醇溶蛋白亞微粒理化性質(zhì)、體外釋藥動(dòng)力學(xué)及穩(wěn)定性研究。DSC實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了5-

6、FU玉米醇溶蛋白亞微粒的形成，優(yōu)化得到的5-FU玉米醇溶蛋白亞微粒外觀圓整，分布均勻，平均粒徑為363.2nm，包封率為(60.7±1.74)％，載藥量為(9.17±0.11)％，Zeta電位為-45.75mV。 以5-FU溶液為對(duì)照，5-FU亞微粒在各種釋放介質(zhì)(pH7.4的磷酸鹽緩沖液、人工胃液、人工腸液和蒸餾水)中的釋放結(jié)果表明，亞微粒在各種介質(zhì)中均有一定的緩釋效果。5-FU亞微粒在pH7.4的磷酸鹽緩沖液中的體外釋放結(jié)果

7、符合雙相動(dòng)力學(xué)方程，方程為100-Q=86.95e-0.3505t±42.91e-0.0121t； 5-FU亞微粒在人工胃液和人工腸液中的釋藥結(jié)果也符合雙相動(dòng)力學(xué)方程，方程分別為100-Q=100.31e-0.2061t+50.19e-0.0361t、100-Q=111.71e-1.0714t+21.55e-0.0454t；在蒸餾水中的雙相動(dòng)力學(xué)方程為100-Q=103.27e-0.538t+27.34e-0.0716t。5-FU溶液在

8、各種介質(zhì)(pH7.4的磷酸鹽緩沖液、人工胃液、人工腸液和蒸餾水)中的釋藥結(jié)果均符合一級(jí)速率方程，分別為ln(100-Q)=-2.29t+4.6044、ln(100-Q)=-5.2894t+4.5812、ln(100-Q)=-6.3204t+4.6224和ln(100-Q)=-4.0835t+4.5833。 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，5-FU亞微粒在40℃下保存1個(gè)月即在底部出現(xiàn)較多的沉淀；在常溫條件下保存3個(gè)月后亞微粒外觀形態(tài)良好，未

9、發(fā)生聚沉，但在6個(gè)月后亞微粒已大部分沉積到底部；亞微粒在4℃下放置3個(gè)月后形態(tài)保持良好，放置6個(gè)月后亦未發(fā)生聚沉，且包封率和載藥量下降較少，因此制備的5-FU亞微粒最適宜在4℃條件下保存。 4.布洛芬玉米醇溶蛋白亞微粒的理化性質(zhì)及體外釋藥動(dòng)力學(xué)研究。本文制備的布洛芬玉米醇溶蛋白亞微粒包封率為(96.7±0.63)％，遠(yuǎn)高于5-FU玉米醇溶蛋白亞微粒的包封率，平均粒徑為218.8nm，Zeta電位為7.20mV。布洛芬玉米醇溶蛋白

10、亞微粒在pH7.4的磷酸鹽緩沖液中的體外釋放結(jié)果符合雙相動(dòng)力學(xué)方程，方程為100-Q=96.43e-0.3975t+39.09e-0.0062t；布洛芬溶液在pH7.4的磷酸鹽緩沖液中的體外釋放結(jié)果符合一級(jí)速率方程，方程為ln(100-Q)=-1.5307t+4.7608。 5.玉米醇溶蛋白亞微粒在小鼠體內(nèi)的組織分布學(xué)研究。利用羅丹明B制備玉米醇溶蛋白亞微粒，熒光分光光度法考察了小鼠尾靜脈注射玉米醇溶蛋白亞微粒后羅丹明B在小鼠心

11、、肝、脾、肺、腎及血漿等組織器官中的分布，通過(guò)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)和靶向性參數(shù)對(duì)玉米醇溶蛋白亞微粒進(jìn)行靶向性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，與羅丹明B溶液相比，小鼠靜注羅丹明B亞微粒后羅丹明B在體內(nèi)的分布發(fā)生了較大的變化，靜注羅丹明B亞微粒后羅丹明B主要分布在肝臟中，總靶向效率提高了31.33％，而在腎臟中的總靶向效率降低了25.32％。小鼠尾靜脈注射羅丹明B亞微粒后主要蓄積在肝中，肝臟中羅丹明B濃度為羅丹明B溶液組的2.13倍，羅丹明B亞微粒在肝臟中的re值為