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文檔簡介
1、干細胞是一類具有自我更新能力、無限增殖能力以及多向分化潛能的原始細胞。多項研究表明,骨髓、神經(jīng)系統(tǒng)及前列腺等組織中存在干細胞。腫瘤干細胞是腫瘤細胞中一小部分具有干細胞性質(zhì)的細胞群體,能夠無限自我更新,并具有多種分化潛能和高度增殖能力,可產(chǎn)生不同表型的腫瘤細胞,形成新的腫瘤。腫瘤干細胞在白血病以及乳腺癌、腦腫瘤、前列腺癌、卵巢癌等實體腫瘤中的存在已經(jīng)得到證實。惡性黑素瘤(malignant melanoma,MM)是一種高度惡性的黑素細胞
2、腫瘤,原發(fā)皮膚多見,占皮膚惡性腫瘤的第三位(6.8%~20%),但死亡率達皮膚惡性腫瘤總數(shù)的80%左右,其世界范圍內(nèi)的發(fā)病率和死亡率均呈逐年上升趨勢。傳統(tǒng)放化療及手術(shù)治療在現(xiàn)階段仍無法克服腫瘤復發(fā)、轉(zhuǎn)移、化學耐藥及高死亡率等現(xiàn)實問題,其可能原因之一是MM中腫瘤干細胞的存在所致。但有關(guān)MM腫瘤干細胞的研究國內(nèi)尚無文獻報道,國外也僅有少數(shù)文獻報道。CD133是一種五次跨膜細胞表面糖蛋白分子,分子量120KD,其表達的特點是隨著細胞的分化迅速
3、下調(diào),這使得它成為一個鑒定和分離干細胞的特異分子標志,其在骨髓、外周血造血干細胞和內(nèi)皮干細胞表達,在成熟內(nèi)皮細胞不表達。CD133可促進新生血管的生成及參與信號傳遞。研究發(fā)現(xiàn),CD133也表達于其他系統(tǒng)的干細胞,如神經(jīng)干細胞、胚胎干細胞、前列腺干細胞等,最近已證明它是腦腫瘤干細胞和前列腺腫瘤干細胞的標志之一。Nestin是一種存在于神經(jīng)上皮干細胞的中間絲成分,在未分化的神經(jīng)多能干細胞中表達,是神經(jīng)干細胞的一個標記物,其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細
4、胞、胰島干細胞及胃腸干細胞中也有表達。研究證實Nestin是腦腫瘤干細胞的表面標志之一。CD44是一種細胞表面糖蛋白分子,是細胞黏附分子的成員之一,它廣泛表達于正常人的上皮細胞、間質(zhì)細胞及一些特定的腫瘤細胞表面,其在淋巴細胞歸巢、細胞與細胞間粘附、細胞與基質(zhì)間相互作用、免疫識別以及細胞的運動中起促進作用。有研究證實CD44與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、復發(fā)關(guān)系密切,已經(jīng)證實CD44為前列腺干細胞、卵巢癌腫瘤干細胞、乳腺癌腫瘤干細胞、前列腺癌
5、腫瘤干細胞和肺癌腫瘤干細胞的表面標志之一。為探討干細胞表面標志物在人MM組織、皮內(nèi)痣組織中的表達及意義,我們采用免疫組化方法對CD133、Nestin和CD44的蛋白表達進行研究,旨在進一步證實MM中存在腫瘤干細胞,并為黑素瘤干細胞的鑒定和分選提供實驗依據(jù)。
材料與方法:1.采用免疫組化SP法檢測CD133、Nestin和CD44在30例MM及30例皮內(nèi)痣皮損中的表達。2.統(tǒng)計學處理:數(shù)據(jù)用(?)±S表示,采用SPSS10.0
6、軟件包進行數(shù)據(jù)分析,計數(shù)資料計算陽性表達率,兩組中CD133、Nestin和CD44陽性表達率的比較用計數(shù)資料的χ~2檢驗(Chi-square);兩組中CD133、Nestin和CD44陽性細胞率平均值的比較用t檢驗;Pearson法計算相關(guān)系數(shù)。檢驗水準均為α=0.05。 結(jié)果:1.CD133的表達CD133在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達率分別為53.33%(16/30)和23.33%(7/30),MM組與皮內(nèi)痣組CD133的
7、陽性表達率比較有統(tǒng)計學意義(χ~2=5.711,P=0.017)。CD133在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細胞率平均值分別為2.98%±5.62%和0.10%±0.21%,MM組與皮內(nèi)痣組CD133的陽性細胞率比較有統(tǒng)計學意義(t=2.801,P=0.007)。CD133在MM中陽性細胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形或多角形,大小不一,大部分陽性細胞在組織中散在分布,部分呈條索狀或巢狀排列;在皮內(nèi)痣陽性細胞形態(tài)大小較為一致,呈圓形、橢圓形,
8、多在組織中散在分布。2.Nestin的表達Nestin在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達率分別為80.00%(24/30)和5333%(16/30),MM組與皮內(nèi)痣組Nestin的陽性表達率比較有統(tǒng)計學意義(χ~2=4.800,P=0.028)。Nestin在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細胞率平均值分別為34.92%±34.89%和7.26%±13.13%,MM組與皮內(nèi)痣組Nestin的陽性細胞率比較有統(tǒng)計學意義(t=4.065,P=0.000
9、)。Nestin在MM中陽性細胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形或多角形等,大小不一,大部分陽性細胞在組織中呈大的團塊狀或巢狀分布,少量呈散在分布;在皮內(nèi)痣陽性細胞形態(tài)大小較為一致,呈圓形、橢圓形,多在組織中散在分布,部分呈小的巢狀分布。3.CD44的表達CD44在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性表達率分別為20.00%(6/30)和0(0/30),MM組與皮內(nèi)痣組CD44的陽性表達率比較有統(tǒng)計學意義(χ~2=6.667,P=0.010)。CD4
10、4在MM組、皮內(nèi)痣組中的陽性細胞率平均值分別為1.28%±3.26%和0,MM組與皮內(nèi)痣組CD44的陽性細胞率比較有統(tǒng)計學意義(t=2.153,P=0.037)。CD44在MM中陽性細胞形態(tài)不一,呈圓形、橢圓形、梭形、多角形等,大小不一,大部分陽性細胞在組織中散在分布,分布不均,偶有局灶性群聚分布現(xiàn)象;在皮內(nèi)痣中呈陰性表達。4.CD133、Nestin和CD44在兩組中陽性細胞率與患者性別、年齡、病程比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P均>0.
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