通過基因修飾的抗原特異性B淋巴細胞的體內(nèi)擴增提高外源治療基因的表達水平.pdf

1、基因治療是指應(yīng)用基因工程和細胞生物學(xué)技術(shù)，將一些具有治療價值的外源基因?qū)塍w內(nèi)，通過修復(fù)或補充失去正常功能的某些基因來達到治療疾病的目的。盡管有關(guān)基因治療的基礎(chǔ)研究已經(jīng)歷時多年并廣泛展開，少數(shù)基因治療藥物還獲準在臨床使用，但是因為安全性和有效性的問題，當(dāng)前基因治療研究的進展緩慢。因此安全和有效是當(dāng)今基因治療中共同關(guān)注的兩大主題。必須在保證安全性的基礎(chǔ)上盡可能的提高基因治療的效率。影響基因治療安全和效率的兩個主要因素是基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)和靶細胞

2、。目前應(yīng)用于基因治療的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)主要有病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)。病毒載體具有高效的優(yōu)點，因此基因治療研究廣為采用。但是由于安全性問題，目前其應(yīng)用已受到了很大限制。非病毒載體盡管安全性較高，但其效率較低，離實際應(yīng)用的要求相差甚遠。目前研究提高非病毒載體的效率來提高基因治療的效率進展緩慢。提高基因治療效率的另一個可能途徑是擴增用于基因治療的靶細胞，使表達外源治療基因的細胞數(shù)量增加，從而使外源治療基因表達水平提高，最終提高基因治療的效率

3、。造血干細胞和記憶性的淋巴細胞都是長壽命的細胞，有利于外源治療基因轉(zhuǎn)入后在體內(nèi)的長期表達，因而是目前基因治療中較為常用的靶細胞。但是，造血干細胞和淋巴細胞的體外長期培養(yǎng)和擴增非常困難，使這些靶細胞的應(yīng)用受到了很大的限制。本研究利用B淋巴細胞受特異性抗原刺激后可在體內(nèi)發(fā)生克隆增生并分化為記憶性B淋巴細胞的特性進行了實驗設(shè)計，使B淋巴細胞經(jīng)過基因修飾，可以同時表達抗原特異性受體和外源治療基因，初步實現(xiàn)在細胞水平和實驗小鼠體內(nèi)外源基因修飾的B