抗膽堿酯酶藥對誘發(fā)糖尿病小鼠的毒性影響.pdf

1、糖尿病這種終身性慢性內分泌疾病發(fā)病率呈逐年上升趨勢，已成為當今世界危害人類生命的第三大疾病。但目前對其發(fā)病機制尚不十分清楚，而且由其引發(fā)的各種疾病更需要進一步研究。另外，動物及人類在健康和生病狀態(tài)下對藥和農(nóng)藥等有毒物質的反應有不同情況，而且關于有毒物質對糖尿病人群尤其是對其腦部影響的研究目前還甚少。因此，本研究從毒理學角度出發(fā)，以抗膽堿酯酶藥為受試物對誘發(fā)糖尿病的小鼠進行了大量毒性研究，目的是闡明農(nóng)藥等有毒物質對糖尿病小鼠的影響，進而為

2、制定農(nóng)藥殘留在農(nóng)畜產(chǎn)品中的限量標準及為進一步研究糖尿病中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)病機制提供依據(jù)。本研究采用通過鏈脲霉素制作的糖尿病模型小鼠，對其進行了胰臟病理切片觀察、腦部Na+，K+-ATPase活性測定、DDVP(殺蟲劑)、Propoxur(殺蟲劑)、Donepezil·HCl(抗癡呆藥)、Methamidophos(殺蟲劑)等四種藥對腦部乙酰膽堿酯酶(AChE)、以及在Intrvio條件下Donepezil· HCl對AChE的活性影響研究

3、。研究結果如下： 1.糖尿病模型小鼠制作試驗：用ICR雌性7周齡小鼠，鏈脲霉素100mg/kg/d給藥2-4次，血糖值顯示300mg/dl，糖尿病組飲水量增多、體重增加受到抑制，糖尿病組與非糖尿病組比較差異顯著(P<0.05)，攝食量無顯著差異，排尿量顯著增多。說明在100mg/kg.d鏈脲霉素劑量下，模型成功。 2.小鼠胰臟病理切片制作及觀察試驗：為了進一步確認用鏈脲霉所做的模型是否為糖尿病模型小鼠，以鏈脲霉素制作的小

4、鼠5只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的5只健康小鼠為對照組，采用胰臟病理切片方法，觀察胰島β細胞是否受到損壞。結果，用鏈脲霉素制作的小鼠，胰臟細胞不緊湊、胰島形狀不規(guī)則，胰島β細胞數(shù)減少、缺如，甚至出現(xiàn)多處空胞，表明胰島組織被嚴重破壞。而未用鏈脲霉素的小鼠胰臟細胞胞質緊密、胰島呈規(guī)則的圓形或橢圓形，胰島α及β細胞數(shù)目多、呈圓形。這進一步驗證了糖尿病模型制作成功。 3.小鼠腦部Na+，K+-ATPase活性的測定：以鏈脲霉素制作的小

5、鼠5只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的5只健康小鼠為對照組，測定了各自的腦部位海馬、紋狀體、大腦皮質的Na+，K+-ATPase活性。結果，糖尿病組海馬、紋狀體、大腦皮質的Na+，K+-ATPase活性明顯降低，糖尿病組與非糖尿病組比較，差異極顯著(P<0.01)。 4.DDVP對鏈脲霉素誘發(fā)的糖尿病小鼠腦部AChE活性的影響：以鏈脲霉素制作的小鼠20只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的20只健康小鼠為對照組，測定其腦部AChE活性。

6、按5mg/kg投與DDVP后，在0min到180min內，糖尿病組與非糖尿病組比較，其腦部海馬、紋狀體、大腦皮質中的AChE活性未發(fā)生顯著性交化。同時，糖尿病組小鼠的振顫及流涎程度較弱，無豎毛現(xiàn)象，而非糖尿病組小鼠的振顫及流涎程度大于糖尿病組，且有輕度豎毛的現(xiàn)象。 5.Propoxur對鏈脲霉素誘發(fā)的糖尿病小鼠腦部AChE活性的影響：以鏈脲霉素制作的小鼠30只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的30只健康小鼠為對照組，測定腦部AChE

7、活性。按10mg/kg投與Propoxur后，在0nun到180min內，糖尿病組與非糖尿病組比較，其腦部海馬、紋狀體、大腦皮質中的AChE活性未發(fā)生顯著性變化。同時，糖尿病組振顫及流涎程度較弱，無豎毛現(xiàn)象，而非糖尿病組小鼠的振顫及流涎程度大于糖尿病組，且有輕度豎毛現(xiàn)象。 6.在In trvio的條件下Donepezil·HCl對AChE活性的影響：在In trvio的條件下，10nM濃度的Donepezil能使57.98％左右

8、AChE受到抑制，而在1000nM濃度的Donepezil時，就能抑制92.44％左右的AChE活性。這說明，Donepezil·HCl在體外對AChE活性具有強烈的抑制作用。 7.Donepezil·HCl對鏈脲霉素誘發(fā)的糖尿病小鼠腦部AChE活性的影響：以鏈脲霉素制作的小鼠30只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的30只健康小鼠為對照組，測定腦部AChE活性。按5mg/kg投與Donepezil·HCl后，與上述試驗結果一樣，在0

9、min到180min內，糖尿病組與非糖尿病組比較，其腦部海馬、紋狀體、大腦皮質中的AChE活性未發(fā)生顯著性變化。同時，糖尿病組振顫及流涎程度較弱，無豎毛現(xiàn)象，而非糖尿病組小鼠的振顫及流涎程度大于糖尿病組，且有輕度豎毛現(xiàn)象。 8.Methamidophos對鏈脲霉素誘發(fā)的糖尿病小鼠腦部AChE活性的影響：以鏈脲霉素制作的糖尿病小鼠20只為試驗組，另選同樣條件下飼養(yǎng)的20只健康小鼠為對照組，測定腦部AChE活性。按7mg/kg投與M