急性低氧對(duì)紅細(xì)胞的損傷以及低氧習(xí)服的保護(hù)作用.pdf

1、目的：從紅細(xì)胞變形性、紅細(xì)胞的膜流動(dòng)性、紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)表達(dá)、紅細(xì)胞膜ATP酶活性及胞內(nèi)Na+和Ca2+濃度方面探討急性低氧對(duì)紅細(xì)胞的損傷以及低氧習(xí)服的保護(hù)作用。 方法：將健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為常氧對(duì)照組、急性低氧組和低氧習(xí)服組，每組10只。采用低壓艙模擬高原低氧環(huán)境對(duì)大鼠分別進(jìn)行急性低氧和間斷低氧習(xí)服，麻醉后心臟采血，分別1．采用F．820全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定大鼠紅細(xì)胞血液學(xué)指標(biāo)，采用LG-B．190血細(xì)胞變形測(cè)試儀

2、測(cè)定紅細(xì)胞變形性；2．采用日立?-4000熒光分光光度計(jì)檢測(cè)代表紅細(xì)胞膜脂流動(dòng)性的DPH熒光偏振度，采用U-2001紫外分光光度計(jì)測(cè)定紅細(xì)胞膜膽固醇和總磷脂含量，采用薄層色譜分析法測(cè)定紅細(xì)胞膜磷脂成分PC、PS、·PE、SM的含量；3．采用雙向電泳建立大鼠紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜，通過ImageMaster2DElite軟件分析尋找出蛋白質(zhì)差異點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。4．采用紅細(xì)胞膜ATP酶活性測(cè)定試劑盒測(cè)定紅細(xì)胞膜ATP酶活性，采用紅

3、細(xì)胞內(nèi)Na+和Ca2+濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定紅細(xì)胞內(nèi)Na+和Ca2+濃度。 結(jié)果：1．急性低氧大鼠紅細(xì)胞總數(shù)、血紅蛋白濃度增加，紅細(xì)胞變形性下降；紅細(xì)胞膜脂流動(dòng)性下降，紅細(xì)胞膜膽固醇含量、總磷脂含量、膽固醇／總磷脂(C/P)比值下降，紅細(xì)胞膜磷脂各成分含量發(fā)生了變化；建立了急性低氧大鼠紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜，并與常氧大鼠紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較，選取7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，其中4個(gè)在急性低氧后表達(dá)下降，其余3個(gè)表達(dá)改變不明顯；紅細(xì)胞

4、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降，紅細(xì)胞內(nèi)Na+濃度和Ca2+濃度升高。2．低氧習(xí)服大鼠紅細(xì)胞總數(shù)、紅細(xì)胞比容、血紅蛋白濃度更高，紅細(xì)胞平均體積較急性低氧組和常氧對(duì)照組下降，紅細(xì)胞變形性比急性低氧組提高，接近常氧刈照組水平；紅細(xì)胞膜脂流動(dòng)性增強(qiáng)，紅細(xì)胞膜膽固醇含量、總磷脂含量、膽固醇／總磷脂(C／P)比值升高，紅細(xì)胞膜磷脂各成分含量發(fā)生了變化；建立了低氧習(xí)服大鼠紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜，并與急性低氧大鼠、常

5、氧大鼠紅細(xì)胞膜蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較，上述7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)中4個(gè)在低氧習(xí)服后表達(dá)增加，3個(gè)表達(dá)下降。蛋白質(zhì)差異點(diǎn)質(zhì)譜技術(shù)鑒定結(jié)果分別為是補(bǔ)體結(jié)合蛋白、水通道蛋白、膜攻擊復(fù)合物抑制因子、脂質(zhì)移行酶、葡萄糖運(yùn)載體、氨基磷脂轉(zhuǎn)移酶、依賴ATP的翻轉(zhuǎn)酶。其中脂質(zhì)移行酶、氨基磷脂轉(zhuǎn)移酶、依賴ATP的翻轉(zhuǎn)酶與紅細(xì)胞膜磷脂翻轉(zhuǎn)有關(guān)；紅細(xì)胞膜Na+-K+-ATP酶和Ca2+．Mg2+_ATP酶明顯升高，紅細(xì)胞內(nèi)Na+濃度和Ca2+濃度降低。 結(jié)論：