STAT1反義寡核苷酸霧化吸入對(duì)肺纖維化大鼠肺組織HSP47表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄活化子1(signal transducer andactivator of transcription1,STAT1)反義寡核苷酸(ASON)霧化吸入對(duì)博來(lái)霉素致肺纖維化大鼠肺組織中熱休克蛋白47(heat shockprotein47,HSP47)表達(dá)的影響,探討其抗纖維化的作用機(jī)制。方法:將45只Wistar大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、模型組和干預(yù)組,每組15只。對(duì)照組氣管內(nèi)灌注生理鹽水,模型組和干預(yù)組

2、氣管內(nèi)灌注博來(lái)霉素,于灌注后第0、2、4、6天對(duì)照組和模型組霧化吸入生理鹽水,干預(yù)組霧化吸入STAT1反義寡核苷酸/DOTAP復(fù)合物。分別于霧化后第7天、第14天和第28天每組各處死5只大鼠。肺組織HE染色和Masson染色觀察肺泡炎和肺纖維化改變,免疫組織化學(xué)SP法測(cè)定肺組織中HSP47的表達(dá)；逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈反應(yīng)(ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)測(cè)定肺組織中

3、Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA表達(dá)；肺組織勻漿測(cè)定羥脯氨酸含量。樣本均數(shù)間比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗(yàn)。結(jié)果:(1)病理切片觀察:對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)的肺組織結(jié)構(gòu)正常。模型組第7天時(shí)肺泡炎最重,肺泡腔內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；第14天時(shí)肺泡腔內(nèi)炎癥細(xì)胞減少,膠原明顯增多,肺泡結(jié)構(gòu)破壞,肺泡隔增寬；第28天肺纖維化程度加重,部分肺泡腔消失,形成嚴(yán)重纖維化。干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度較輕,膠原纖維增生較少,第28天時(shí)肺泡結(jié)構(gòu)尚存。干預(yù)組各時(shí)間

4、點(diǎn)肺泡炎和纖維化程度評(píng)分(分別為2.6±0.9、2.2±0.5、1.8±0.8及1.6±0.6、2.2±0.6、2.6±0.6)較模型組(分別為3.6±0.6、3.2±0.5、2.4±0.6及2.2±0.5、3.2±0.5、4.4±0.6)明顯降低(P<0.05),干預(yù)組和模型組較對(duì)照組(各時(shí)間點(diǎn)分別為1.4±0.6、1.0±0.0、1.0±0.0及1.0±0.0、1.0±0.0、1.0±0.0)明顯增高(P<0.05)。(2)對(duì)照組、

5、模型組、干預(yù)組肺組織HSP47表達(dá)積分吸光度值第7天分別為94.58±4.84、279.22±6.14、206.45±5.21,第14天分別為93.98±5.66、338.78±11.59、278.02±9.22,第28天分別為92.92±4.15、388.24±9.32、323.73±13.51。與對(duì)照組比較,模型組、干預(yù)組肺組織HSP47表達(dá)水平均顯著升高(P<0.01)。與模型組比較,干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)HSP47表達(dá)水平均降低(P<0

6、.05)。(3)干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA相對(duì)表達(dá)量(分別為1.36±0.10、1.19±0.28、1.22±0.24及1.20±0.09、0.62±0.09、0.76±0.12)較模型組(分別為3.29±0.28、2.04±0.25、1.91±0.30及1.63±0.15、1.58±0.13、1.12±0.09)明顯降低(P<0.05),干預(yù)組和模型組較對(duì)照組(各時(shí)間點(diǎn)分別為0.68±0.15、0.81±0.16、0.79±0

7、.05及0.35±0.04、0.40±0.17、0.31±0.04)明顯增高(P<0.05)。(4)干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)羥脯氨酸含量[分別為(3.02±0.13)mg/g、(3.24±0.31)mg/g、(3.60±0.16)mg矧較模型組[分別為(3.76±0.10)mg/g、(3.92±0.30)mg/g、(4.62±0.28)mg/g]降低(P<0.05),干預(yù)組和模型組較對(duì)照組[分別為(1.99±0.10)mg/g、(1.99±0.1