P2Y6受體參與LPS誘導的小膠質細胞MIP-2表達和分泌.pdf

1、目的：探討脂多糖（LPS）刺激下小膠質細胞表面膜受體P2Y6對巨噬細胞炎癥蛋白-2（MIP-2）的表達及分泌的影響以及可能的作用機制，揭示小膠質細胞與神經(jīng)元相互作用的橋梁，為以后神經(jīng)變性疾病的治療開辟新的切入點打下基礎。 方法：采用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)方法檢測LPS刺激小膠質細胞BV-2后MIP-2的表達及釋放，采用Western blot檢測LPS刺激BV-2細胞P2Y6受體的表

2、達。分別觀察P2Y6受體激動劑UDP、特異性抑制劑MRS2578和三磷酸腺苷二磷酸酶apyrase對BV-2細胞MIP-2表達及釋放的影響。檢測UDP作用于BV-2細胞后細胞外信號調節(jié)蛋白激酶（ERK1/2）、P38激酶、c-Jun氨基末端激酶（JNK）的表達，以及分別加入三者的抑制劑U0126、SB203580和SP600125后對MIP-2表達及釋放的影響。采用TUNEL方法檢測BV-2和N-2a細胞共培養(yǎng)體系中神經(jīng)元凋亡的改變。

3、 結果：①LPS刺激小膠質細胞后P2Y6受體表達增加，同時MIP-2 mRNA 表達和MIP-2分泌也增加。②MRS2578和apyrase能夠部分抑制LPS刺激小膠質細胞引起的MIP-2的表達及釋放，而MRS2578能夠顯著抑制UDP誘導小膠質細胞產(chǎn)生的MIP-2。③P2Y6受體激動劑UDP誘導小膠質細胞ERK1/2磷酸化，p-ERK1/2的抑制劑U0126能夠顯著抑制LPS刺激MIP-2的表達及分泌，而SB203580和SP6