新型B細胞亞群的發(fā)現(xiàn)及其免疫調(diào)控功能與機制的研究.pdf

1、近年來，人們對于免疫細胞亞群及其功能的認識大為拓展，特別是對于T細胞亞群的研究有了許多新的進展，除了以往廣泛公認的Th1、Th2之外，近年來對于調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)、Th17、Th9，Tfh等T細胞亞群的進一步區(qū)分與功能特征的研究以及與臨床疾病的聯(lián)系，使得人們對于免疫應(yīng)答與免疫調(diào)控的細胞與分子機制研究有了更深入的認識。此外，對于巨噬細胞和樹突狀細胞(DC)的亞群、特別是M2和調(diào)節(jié)性DC亞群的研究也有了新的進展。但是，目前對于機體體液

2、免疫中最關(guān)鍵的免疫細胞---B細胞(B lymphocytes)的亞群及其相應(yīng)的功能特征的研究相比而言比較少。過去認為B細胞通過分泌抗體，在體液免疫系統(tǒng)中發(fā)揮“指揮家”的作用；B細胞還是一類重要的抗原提呈細胞，參與對抗原的攝取、加工、提呈，在啟動獲得性免疫應(yīng)答中起重要作用；此外，B細胞還可以通過分泌多種細胞因子和某些趨化因子以及表達某些重要膜分子，參與免疫應(yīng)答的調(diào)控?？梢姡珺細胞具有功能多樣性，通過進一步研究B細胞的亞群組成及其功能特征

3、，將有助于全面認識B細胞的功能和作用，從而對免疫應(yīng)答與調(diào)控的方式與機制增添新的學術(shù)觀點。
　　 根據(jù)表面分子、定位和功能特點的不同，B細胞被分為B-1細胞和B-2細胞。B-2細胞即為傳統(tǒng)意義的B細胞。而B-1細胞主要在胚胎的胎肝、網(wǎng)膜中發(fā)育，分布于腹腔、胸腔和腸壁固有層中，又分為B-1a細胞(CD11b+CD5+)和B-1b細胞(CD11b+CD5-)。B-1細胞在IL-10幫助下保持自我更新能力，通過識別某些細菌表面共有的多糖

4、抗原和一些變形的自身抗原， B-1a細胞及其分泌的自身抗體在幼兒的抗感染免疫中提供有效保護，而B-1b細胞在感染時則能對多糖和其他非T細胞依賴性的抗原產(chǎn)生長效的抗體應(yīng)答。近年來，人們發(fā)現(xiàn)了一類可以分泌IL-10的B細胞，根據(jù)其功能而將之稱為調(diào)節(jié)性B細胞(regulatory B cell)，作為一類新的B細胞亞群，其能夠調(diào)節(jié)機體免疫應(yīng)答，大量的基礎(chǔ)研究和臨床證據(jù)表明，B細胞的功能具有明顯的異質(zhì)性，提示B細胞在免疫應(yīng)答被激活后可能分化為多

5、個不同的功能亞群參與并調(diào)控免疫應(yīng)答，參與腫瘤、自身免疫性疾病等疾病的發(fā)生發(fā)展過程，因此，有關(guān)新的B細胞亞群的發(fā)現(xiàn)與功能分析成為近年來免疫學研究的熱點之一。
　　 由于天然免疫系統(tǒng)是機體抵御病原體入侵的第一道屏障，近年來已成為免疫學研究的重要領(lǐng)域，天然免疫應(yīng)答由NK細胞、巨噬細胞、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞和肥大細胞等天然免疫細胞介導，通過模式識別受體識別細菌、真菌及病毒成分并活化，引發(fā)下游的多種免疫效應(yīng)，但B細胞在其中的作用如何尚

6、不明確。但一方面，B細胞能夠不依賴BCR信號介導而被活化；另一方面，由于B細胞能表達多種Toll樣受體(如TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR9)和其他的模式識別受體識別，那么病原體感染后微環(huán)境中存在的多種TLR配體及模式識別配體有可能能夠通過與B細胞上的受體交聯(lián)，激發(fā)下游的信號傳遞，從而為B細胞參與天然免疫反應(yīng)以及隨后調(diào)控免疫反應(yīng)奠定了基礎(chǔ)。
　　 考慮到B細胞組成的異質(zhì)性以及B細胞參與天然免疫應(yīng)答和調(diào)控獲

7、得性免疫應(yīng)答的多樣性功能特點，我們在本研究中分為三部分，研究了病原體感染或者病原體成分激活天然免疫反應(yīng)之后B細胞的亞群組成，以及我們所發(fā)現(xiàn)和鑒定的新型B細胞亞群的功能特點與相關(guān)作用機制，還對B細胞發(fā)育和功能分化的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機制進行了初步探討，以期為B細胞參與免疫應(yīng)答調(diào)控及其作用機制，以及其功能分化的分子機制增添新的認識。
　　 一、CD19+DX5+B細胞亞群(NKB)的發(fā)現(xiàn)及其參與天然免疫、調(diào)控獲得性免疫的作用與相關(guān)機制。<

8、br>　　 二、CD19+PDCA-1+B細胞亞群的發(fā)現(xiàn)及其參與天然免疫功能與機制的研究。
　　 三、轉(zhuǎn)錄因子Foxp1對B細胞功能調(diào)控作用的初步探討。
　　 四、總結(jié)
　　 在第一部分實驗中，發(fā)現(xiàn)并鑒定了一群具有NK細胞樣特征、能夠分泌IFN-γ的DX6+CD19++B細胞，稱為NKB細胞亞群。NKB細胞能在免疫應(yīng)答早期(李斯特菌感染3天內(nèi)天然免疫階段)通過分泌IFN-γ激活巨噬細胞、促進其對胞內(nèi)菌的清除，發(fā)

9、揮了NK細胞樣的功能；NKB細胞能在免疫應(yīng)答晚期(李斯特菌感染7天獲得性免疫階段)通過分泌的IFN-γ上調(diào)自身FasL及抗原特異性CD8+T細胞表面Fas的表達，從而誘導CD8+T細胞凋亡，從而發(fā)揮了調(diào)節(jié)性B細胞的功能，適度控制了獲得性免疫應(yīng)答的強度，從而使得抗原特異性T細胞應(yīng)答反應(yīng)受到適度的負相調(diào)控，有助于維持免疫應(yīng)答的穩(wěn)定性?？梢?，該病原體感染誘導產(chǎn)生的新型NKB細胞亞群具有NK細胞的天然免疫應(yīng)答效應(yīng)和調(diào)節(jié)性B細胞的負相免疫調(diào)控功能

10、，其分泌的IFN-γ在介導其雙重功能中起重要的作用。新型B細胞亞群(DX5+CD19+NKB)的發(fā)現(xiàn)與初步揭示的其功能特點，為天然免疫的效應(yīng)機制增添了新的學術(shù)觀點，也豐富了人們對調(diào)節(jié)性B細胞的負向調(diào)控功能及機制的認識，并為獲得性免疫負向調(diào)控提出了新機制。
　　 在第二部分實驗中，發(fā)現(xiàn)并鑒定了一群能分泌IFN-α的CD19+PDCA-1+B細胞，該新型B細胞亞群能通過分泌的IFN-α而激活NK細胞并促進其分泌IFN-γ，從而參與、

11、促進了胞內(nèi)菌感染早期的天然免疫應(yīng)答過程。此外，我們的研究結(jié)果證明，IFN-α能正反饋調(diào)節(jié)IFN-γ信號通路，這一發(fā)現(xiàn)為病原體入侵機體后天然免疫應(yīng)答的快速啟動及蛋白調(diào)控提出了新機制，也為B細胞的天然免疫功能增添了新的認識。
　　 在第三部分實驗中，我們對B細胞及其亞群的發(fā)育及功能分化的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機制進行了初步探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在LPS體外刺激和李斯特菌體內(nèi)感染后轉(zhuǎn)錄因子Foxp1的表達均能促進B細胞分泌IL-10，但其炎性因子分泌

12、變化趨勢并不相同，我們推測Foxp1對B細胞負向免疫調(diào)控功能可能具有潛在的誘導作用，而其對B細胞抗感染免疫應(yīng)答的調(diào)控作用以及在B細胞亞群產(chǎn)生和功能中作用尚不明確，需要將來開展進一步實驗深入探討。
　　 總之，深入研究B細胞及其亞群在不同感染模型中的功能及其機制將有助于我們進一步了解B細胞在機體受到外來病原體或者異源抗原刺激后免疫應(yīng)答的啟動、維持和調(diào)控中的作用，更加全面認識機體復雜而平衡的免疫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并為免疫細胞亞群認識的拓展及