IL-18和MMP-9在人粥樣硬化冠狀動脈中的表達及與斑塊穩(wěn)定性的初步研究.pdf

1、近年來，人們對冠心病的病理生理學的認識有了明顯的轉(zhuǎn)變，動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)被認為是主動的炎癥性過程，而不是單純的脂質(zhì)被動浸潤。在AS斑塊形成、進展以及并發(fā)血栓形成過程中炎癥均展現(xiàn)其重要特征。這一過程里有眾多的炎癥因子的參與及表達。其中，IL-18是近年來發(fā)現(xiàn)的一個重要的多效能細胞因子，它能夠誘導單核巨噬細胞和T淋巴細胞分泌干擾素γ(IFN-γ)，通過直接和間接途徑促進MMP-9的分泌和表達，促進AS的發(fā)生

2、和發(fā)展。 目的：本實驗檢測IL-18、MMP-9蛋白及mRNA在冠狀動脈粥樣硬化斑塊中的表達水平及兩者相關(guān)性。分析IL-18、MMP-9與冠狀動脈粥樣硬化的關(guān)系，為今后臨床有效的對冠心病進行診斷、治療和預后的評估提供實驗依據(jù)。 方法：14例尸檢冠狀動脈，通過病史及肉眼觀察確定5例為正常冠狀動脈，9例為粥樣硬化冠狀動脈。分離所有病例的冠狀動脈即左冠狀動脈及右冠狀動脈并進行取材。通過HE染色光鏡觀察將標本分為不穩(wěn)定斑塊組(1

3、6個)、穩(wěn)定斑塊組(21個)、粥樣硬化冠狀動脈非斑塊區(qū)域組(6個)、正常冠狀動脈組(5個)。粥樣硬化冠狀動脈非斑塊區(qū)域組及正常冠狀動脈組為對照組。分別將這四組標本進行免疫組織化學染色及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應，并通過檢測巨噬細胞(CD-68)、平滑肌細胞(α-actin)進行定位。結(jié)果進行統(tǒng)計學處理，采用秩和檢驗、卡方檢驗、Spearman檢驗。 結(jié)果：(1) RT-PCR結(jié)果顯示IL-18、MMP-9在冠狀動脈粥樣硬化斑塊中有mRN

4、A的表達，在對照組中無表達。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊表達有差異(p<'IL-18>=0.028，p<'MMP-9>=0.036)，不穩(wěn)定斑塊中IL-18和MMP-9mRNA表達高于穩(wěn)定斑塊。Spearman非參數(shù)等級相關(guān)性統(tǒng)計分析顯示：兩者在冠狀動脈粥樣硬化斑塊表達強度呈正相關(guān)關(guān)系(r<'s>=0.375， P=0.022)。 (2)免疫組織化學表達結(jié)果：IL-18主要在粥樣硬化冠脈內(nèi)膜區(qū)域表達，在對照組中無表達。表達的部位為巨噬細胞、泡沫

5、細胞、纖維細胞、內(nèi)皮細胞、內(nèi)膜平滑肌細胞，主要定位在巨噬細胞和泡沫細胞，在中膜平滑肌基本不表達。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊表達有差異(P=0.028)，不穩(wěn)定斑塊中IL-18表達高于穩(wěn)定斑塊。MMP-9在冠脈粥樣硬化斑塊中有表達，在對照組中無表達。表達的部位為內(nèi)膜巨噬細胞、泡沫細胞、纖維細胞胞核及核周、內(nèi)皮細胞胞核及核周、平滑肌細胞，中膜平滑肌細胞和纖維細胞。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊的內(nèi)膜和中膜的表達均有差異(P<'內(nèi)膜>=0.012，P<'中膜

6、>=0.033)，不穩(wěn)定斑塊中MMP-9表達高于穩(wěn)定斑塊。Spearman非參數(shù)等級相關(guān)性統(tǒng)計分析顯示：兩者在粥樣硬化冠狀動脈內(nèi)膜區(qū)域的表達強度呈正相關(guān)關(guān)系(r<'s>=0.401，P=0.014)。 (3)IL-18和MMP-9的mRNA和蛋白表達的水平基本一致。 結(jié)論：(1)在正常冠狀動脈中無IL-18和MMP-9的表達，在冠狀動脈粥樣硬化斑塊中有IL-18和MMP-9的表達，并且不穩(wěn)定斑塊的表達高于穩(wěn)定斑塊。提示