胃腸動力障礙分子機制和大黃素作用機理研究.pdf

1、論文一:TNFα影響結腸環(huán)形平滑肌細胞動力的信號轉導機制 目的:探討TNFα對結腸平滑肌細胞舒縮功能的影響和其發(fā)揮作用的信號轉導途徑.方法:采用平滑肌細胞長度測定和激光掃描共聚焦顯微鏡鈣測定技術,觀測①不同濃度（1,5,10,50ng/ml )TNFα對平滑肌細胞細胞長度和[Ca<'2+>]<,i>的影響.②TNFα與平滑肌細胞孵育,平滑肌細胞對不同濃度KCL、ACH反應的變化,③使用PD-98059（ERK MAPK抑制劑）、mano

2、alide（磷酯酶A2抑制劑）對TNFα引起平滑肌細胞反應性變化的影響.結論：雖然TNFα對平滑肌細胞的收縮和[Ca<'2+>]<,i>沒有直接影響,但TNFα可輔助增強G蛋白偶聯的鈣敏感性調節(jié),可能的信號轉導途徑是通過ERK MAPK激活磷脂酶A<,2>產生花生四烯酸,增強G蛋白偶聯的鈣敏感性調節(jié).論文二：TNFα刺激結腸平滑肌細胞產生一氧化氮的信號轉導機制 目的：探討TNFα刺激結腸平滑肌細胞生成NO的信號轉導途徑.方法：NO測定采

3、用Gresis法,iNOSmRNA表達的測定采用RT-PCR法,iNOS表達和NF-κB核漿的移位的檢測采用免疫熒光技術檢測.觀測TNFα刺激下,平滑肌細胞NO生成量、iNOSmRNA、iNOS表達的變化,NF-κB核漿移位;以及應用L-NiL和MG115后,上術指標的變化情況.結論：TNFα刺激平滑肌細胞后通過活化NF-κB,啟動iNOSmRNA的轉錄和iNOS蛋白翻譯,隨之催化NO生成.表明胃腸道平滑肌細胞在胃腸動力障礙的發(fā)生中,不

4、僅僅是被動的“靶器官”,更重要的是作為一種主動的“效應器”來發(fā)揮作用.論文三：大黃素收縮結腸環(huán)形平滑肌細胞信號轉導機制研究 目的：探討大黃素對結腸環(huán)形平滑肌細胞的收縮作用,和它升高[Ca<'2+>]<,i>的機制以及大黃素發(fā)揮作用的信號轉導途徑.方法：采用平滑肌細胞長度測定、胞漿游離鈣測定技術以及激光掃描共聚焦顯微鏡技術,①觀測大黃素對平滑肌細胞長度的影響;②觀測Heparine、Ryanodine、Nifedipine等對大黃素鈣動員