消痞Ⅱ號對胃腸動力障礙小鼠的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：功能性胃腸病(FGIDs)是消化內(nèi)科常見而且占據(jù)重要地位的疾病,FGIDs被解釋為具有雙向調(diào)節(jié)作用的腦一腸軸通過社會心理因素和腸道生理的改變(動力/或內(nèi)臟感覺障礙)相互作用的臨床表達(dá)。功能性消化不良(FD)和腸易激綜合征(IBS)都是西方國家常見的胃腸道疾病,發(fā)病率分別為10-20％和20-40％。FGIDs是常見的慢性疾病,僅IBS,北美約3000萬人符合診斷標(biāo)準(zhǔn)。Fgins和消化不良患者胃排空延遲密切相關(guān),約40％的功能性消化

2、不良患者有胃排空延遲。規(guī)范化的藥物治療功能性消化不良包括:抑酸劑和促動力劑,但是這些藥通常并不能夠得到滿意的療效,降低了病人的生活質(zhì)量,增加了醫(yī)療的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),所以大量的未被證明的替代品得到了廣泛應(yīng)用。
　　 中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)非常重視脾胃的功能,中醫(yī)藥對脾胃病的治療有著完整的理論和相當(dāng)豐富的經(jīng)驗。中草藥在治療消化不良癥狀方面具有悠久的歷史,包括單味藥或成方。功能性消化不良在癥狀學(xué)上和中醫(yī)理論的“痞滿”非常相似,腹脹多為其主訴。脾胃虛弱

3、是功能性消化不良的主要原因,導(dǎo)致運化失司和升降失調(diào)。脾胃虛弱導(dǎo)致消化、吸收和代謝功能降低,因此出現(xiàn)營養(yǎng)不良,一般功能活動的降低。消痞Ⅱ號是口服的中草藥方劑,通過傳統(tǒng)中醫(yī)理論“益脾氣”為法調(diào)節(jié)胃腸道動力并治療功能性消化不良。在本研究中,我們通過建立胃動力障礙動物模型,觀察消痞Ⅱ號對小鼠胃排空及腸推進(jìn)的影響,并檢測本方對M3受體及神經(jīng)遞質(zhì)NO及VIP的影響。
　　 方法：
　　 1、消痞Ⅱ號對阿托品介導(dǎo)的胃腸動力障礙小鼠的胃

4、腸動力及地受體的影響。
　　 120只健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為正常組(n=30),消痞Ⅱ號組(n=30),阿托品組(n=30),消痞Ⅱ號+阿托品組(n=30)。正常組、阿托品組小鼠每日2次灌服生理鹽水(0.2ml/10g體重);消痞Ⅱ號組、消痞Ⅱ號+可托品組小鼠每日2次灌服消痞Ⅱ號(0.2ml/10g體重),共7天。最后1次灌服50分鐘后,阿托品組和消痞Ⅱ號+阿托品組小鼠腹腔注射阿托品2mg/kg。同時,正常組和消痞Ⅱ號組小鼠腹

5、腔注射生理鹽水2mg/kg。阿托品作用30分鐘后,給予以上4組小鼠灌服營養(yǎng)半固體炭末糊,0.5ml/只。進(jìn)食營養(yǎng)半固體炭末糊30分鐘后,脫頸處死所有小鼠,剖腹,將賁門至回盲部迅速取出。結(jié)扎賁門和幽門,稱胃全重,然后沿胃大彎切開,用水沖掉胃內(nèi)容物,濾紙吸干,稱重?？漳c到回盲部取出放入冷水中,防止繼續(xù)蠕動,將其自然拉直鋪平,測量幽門括約肌至半固體糊前端的長度及幽門至盲部的長度。胃排空率(％)=[1-(胃全重一胃凈重)/0.5]×100％,小

6、腸推進(jìn)率(％)=幽門至炭末糊前端的長度/幽門至回盲部的長度×100％。胃壁M3受體的免疫表達(dá)通過SP方法和光學(xué)光密度分析檢測。
　　 2、消痞Ⅱ號對功能性消化不良小鼠胃排空及NOS、VIP表達(dá)的影響。
　　 120只健康雄性昆明小鼠隨機(jī)分為正常組(n=30),模型組(n=30),消痞Ⅱ號組(n=30),莫沙比利組(n=30)。正常組小鼠正常進(jìn)食水,其余組小鼠單日喂飼甘蘭,雙日喂豬脂,數(shù)量不限,持續(xù)9天,建立功能性消化不良

7、小鼠動物模型。第10天,分別給予正常組、模型組小鼠灌服生理鹽水(0.2ml/10g體重),消痞Ⅱ號組小鼠灌服消痞Ⅱ號(0.2ml/10g體重),莫沙比利組小鼠灌服莫沙比利混懸液(0.2ml/10g體重),共7天。第17天,并且禁食,最后1次灌服藥物20分鐘后,給予所有小鼠灌服營養(yǎng)半固體炭末糊,0.5ml/只。30min后,脫頸處死所有小鼠,剖腹,結(jié)扎賁門和幽門,將胃迅速取出。稱胃全重,然后沿胃大彎切開,用水沖掉胃內(nèi)容物,濾紙吸干,稱重,

8、計算胃排空率(％)=[1-(胃全重一胃凈重)/0.5]×100％。將胃排空實驗中留取的胃竇標(biāo)本取出,進(jìn)行梯度酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,4μm切片,HE染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察胃竇組織結(jié)構(gòu)。胃壁M3受體的免疫表達(dá)通過SP方法和光學(xué)光密度分析檢測。
　　 3、統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,組間比較應(yīng)用方差(ANOVA)分析,P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

9、
　　 結(jié)果：
　　 1、消痞Ⅱ號對阿托品介導(dǎo)的胃腸動力障礙小鼠的影響正常組和阿托品組之間,胃排空率和腸推進(jìn)率存在顯著差異(P＜0.01,P＜0.01)。灌服消痞Ⅱ號7天后,消痞Ⅱ號能夠增加胃排空率(69.27±9.77％vs正常組54.67±16.01％,P＜0.01)和腸推進(jìn)率(84.71±8.39％vs正常組74.97±11.93％,P＜O.01)。消痞Ⅱ號組和消痞Ⅱ號+阿托品組之間也存在顯著差異(P＜0.01)。

10、消痞Ⅱ號明顯改善阿托品介導(dǎo)的胃排空率和腸推進(jìn)率的減少。注射阿托品后,胃底平滑肌M3受體比正常組明顯減少(P＜0.01),消痞Ⅱ號+阿托品組胃底平滑肌M3受體水平比正常組明顯增高(P＜0.01)。
　　 2、消痞Ⅱ號對功能性消化不良小鼠胃排空及NOS、VIP表達(dá)的影響。
　　 正常組小鼠毛色潔白光亮,柔軟光滑,精神狀態(tài)良好;模型組小鼠毛色發(fā)黃干枯,糞便臭穢難聞,精神疲憊。經(jīng)治療后小鼠毛色、糞便、精神均有所好轉(zhuǎn)。各組小鼠胃黏

11、膜均無器質(zhì)性病理組織學(xué)改變。模型組小鼠胃排空率下降(P＜0.05):各治療組與正常組比較,胃排空率上升有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),說明2組藥物均能提高胃排空率:消痞Ⅱ號組與莫沙比利組比較無明顯差異(P＞0.05)。消痞Ⅱ號可明顯增加FD小鼠胃竇NOS含量,降低FD小鼠VIP含量,其結(jié)果與莫沙比利無明顯差別。
　　 結(jié)論：
　　 1、消痞Ⅱ號具有促進(jìn)正常小鼠胃排空及腸推進(jìn)的功能,并能糾正阿托品介導(dǎo)的胃排空障礙。M3受