PolyI-C誘導(dǎo)氣道平滑肌細(xì)胞TLLR3和IL-8、Eotaxin的表達(dá).pdf

1、目的:觀察PolyI:C對(duì)大鼠氣道平滑肌細(xì)胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)Toll樣受體3(toll-like receptors,TLR3)及炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響,探討ASMCs中TLR3表達(dá)與氣道炎癥的關(guān)系。
　　 方法:體外培養(yǎng)大鼠ASMCs,傳代培養(yǎng)后分為正常對(duì)照組(A組)和PolyI:C刺激組。又根據(jù)不同的時(shí)間點(diǎn)將PolyI:C刺激組分為:PolyI:C刺激后1h(B組)、4h(

2、C組)、8h(D組)、16h(E組)、24h(F組),PolyI:C的終濃度為25μg/ml。用RT-PCR法檢測(cè)ASMCs中TLR3 Mrna的表達(dá);Western blot法檢測(cè)ASMCs中核因子Kb(nuclear factor-Kb,NF-Kb)的蛋白含量;ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-8和Eotaxin的濃度。
　　 結(jié)果:
　　 (1)ASMCs中TLR3 Mrna的表達(dá),C、D、E、F組(分別為0.

3、357±0.02、O.560±0.03、O.593±0.02、0.650±0.02)明顯高于A組(O.258±O.03),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05),B(O.267±0.02)組與A組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (2)ASMCs中NF-Kb蛋白的表達(dá),C、D、E、F組分別為(0.56±0.03、O.64±0.03、0.69±O.04、0.81±0.06)明顯高于A組(0.30±0.02),差異有統(tǒng)計(jì)

4、學(xué)意義(P＜0.05),B(O.32±0.02)組與A組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (3)ASMCs培養(yǎng)上清液中IL-8和Eotaxin的濃度,C、D、E、F組分別為(186.2±7.5)pg/ml、(371.9±11.8)pg/ml、(473.3±23.0)pg/ml、(669.4±36.0)pg/ml和(104.6±5.8)pg/ml、(286.0±8.6)pg/ml、(367.8±29.1)pg/ml

5、、(540.0±22.3)pg/ml明顯高于A組[(109.7±7.2)pg/ml和(79.9±6.1)pg/ml],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),B組[(117.6±6.5)pg/ml和(83.9±5.5)pg/ml]與A組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (4)上清液中IL-8、Eotaxin的含量與TLR3 Mrna表達(dá)水平呈線性正相關(guān)關(guān)系(r=0.948、0.939,P＜0.05)。
　　 結(jié)