胰淀素誘導(dǎo)原代培養(yǎng)鼠胰島細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 胰島淀粉樣蛋自沉積和β-細(xì)胞數(shù)減少是2型糖尿病的病理特征,胰島β-細(xì)胞分泌的胰淀素是胰島淀粉樣蛋白主要成份.目前認(rèn)為胰淀素的異常聚集在2型糖尿病的胰島β-細(xì)胞損傷中發(fā)揮重要作用,但其作用機(jī)制尚不十分清楚,而組織細(xì)胞的過度凋亡是機(jī)體許多疾病發(fā)病的重要機(jī)制.為此該文的研究目的有如下幾點(diǎn):1.體外觀察合成的人胰淀素(HA)在溶液中的聚集形態(tài)和特點(diǎn).2.證實(shí)HA誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡.3.探討鈣離子在HA誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡途經(jīng)中的作用.4.探討

2、一些藥物對(duì)HA誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡的影響.方法:1.電鏡觀察HA在體外聚集成原纖維的形態(tài),建立<'125->I標(biāo)記HA沉降率法分析HA在體外孵育不同時(shí)間后的聚集程度.2.MTT還原分析及鈣黃綠素—AM/乙錠同型二聚體雙熒光染色計(jì)數(shù),分析HA孵育后胰島細(xì)胞的存活率.3.采用電鏡、DNA瓊脂糖凝膠電泳、Hoechst33342染色觀察HA誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變和生化特點(diǎn).4.通過fura-2/AM染色和測定細(xì)胞外<'45>CaCl<,2>