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1、 目的:研究大黃素在保護(hù)阻塞性黃疸大鼠腸粘膜屏障,防止細(xì)菌移位及減輕肝纖維化方面的作用,旨在探索大黃素對(duì)阻塞性黃疸的治療作用,為臨床治療阻塞性黃疸提供依據(jù)?! 》椒ǎ罕菊n題分為兩大部分,實(shí)驗(yàn)方法1用SD大鼠60只,實(shí)驗(yàn)方法2用SD大鼠72只,共用大鼠132只。 1.大黃素對(duì)細(xì)菌移位影響的實(shí)驗(yàn)方法?! ∵x用健康SD大鼠60只,雌雄不拘,體重220±20g,由廣東醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供,均經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后才用于實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)
2、分為3組,每組n=20只:(1)SO+NS組(生理鹽水10ml/kg灌胃qd,即假手術(shù)組);(2)BDL+NS組(生理鹽水10ml/kg灌胃qd,即單純膽總管結(jié)扎組);(3)BDL+ED組(用大黃素60mg/kg濃度6mg/ml灌胃qd,即膽總管結(jié)扎+大黃素組)。3組動(dòng)物均于7d后處死,處死前1d以胃內(nèi)插管給予10ml/kg用吖啶橙標(biāo)記之大腸桿菌菌液,24h后處死大鼠取出腸系膜淋巴結(jié)勻漿后在熒光鏡下觀察細(xì)菌移位,并計(jì)算移位率。
3、2.大黃素對(duì)肝纖維化及腸粘膜屏障影響的實(shí)驗(yàn)方法?! ∵x用健康SD大鼠72只,雌雄不拘,體重220±20克,由廣東醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供,均經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后才用于實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為3組:(1)SO+NS組(生理鹽水10ml/kg灌胃qd,即假手術(shù)組);(2)BDL+NS組(生理鹽水10ml/kg灌胃qd,即單純膽總管結(jié)扎組);(3)BDL+ED組(用大黃素60mg/kg濃度6mg/ml灌胃qd,即膽總管結(jié)扎+大黃素組),每組再隨機(jī)分為
4、7d、14d和21d三個(gè)時(shí)間段進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,每組n=8,用藥方法、劑量與細(xì)菌移位的實(shí)驗(yàn)方法相同。按時(shí)間段7、14和21d處死大鼠,取下腔靜脈血檢測(cè)ALT、AST、TB,取各組實(shí)驗(yàn)大鼠肝臟和回腸制成石蠟切片,用測(cè)微尺測(cè)量絨毛高度和粘膜厚度;另取0.5cm回腸置于液氮中保存,待測(cè)腸壁DNA含量。 結(jié)論:1.大黃素具有保護(hù)阻塞性黃疸大鼠腸粘膜屏障、防止細(xì)菌移位的作用,表現(xiàn)為用大黃素后小腸絨毛高度、粘膜厚度和DNA含量明顯高于未用組(BDL
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