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文檔簡介
1、目的:利用基因芯片技術(shù),分析溫陽消飲法對胸腔積液大鼠胸膜基因表達(dá)的調(diào)控作用。
方法:48只雄性SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后,隨機(jī)分為A組(40只)與空白對照組(8只)。A組動(dòng)物以戊巴比妥鈉麻醉后,采用1%λ-角叉菜膠溶液進(jìn)行右側(cè)胸膜腔注射。24h后,運(yùn)用CR數(shù)字成像系統(tǒng)觀察胸部X光片,篩選出胸腔積液明顯的大鼠,作為造模成功的動(dòng)物備用。將造模成功的動(dòng)物隨機(jī)分為:溫陽消飲組(10只),每日1次溫陽消飲法代表方水煎液灌胃(5ml/kg)
2、;模型組(9只),每日1次生理鹽水灌胃(5ml/kg)??瞻讓φ战M(8只),每日1次生理鹽水灌胃(5ml/kg)。連續(xù)給藥4天后,動(dòng)物進(jìn)行安樂死。每組取3只動(dòng)物的右側(cè)臟層和壁層胸膜,利用Agilent單通道表達(dá)譜芯片對胸膜組織基因表達(dá)情況進(jìn)行分析。
結(jié)果:
?壁層胸膜組織
模型組與空白對照組、溫陽消飲組與模型組差異表達(dá)基因涉及多個(gè)生物學(xué)過程和信號(hào)通路。在造模因素作用下,基因Fgd4、Mef2a、Fhl3、D
3、yrk2、Slc24a6、Pbrm1、LOC498368、Tp53i11、Rcan3、Hapln4、Abi1和Hlx表達(dá)上調(diào),在中藥干預(yù)下表達(dá)下調(diào);Nme7、Pold2、Klk1l和Fkbp5在造模條件下表達(dá)下調(diào),用藥后上調(diào)。
?臟層胸膜組織
模型組與空白對照組、溫陽消飲組與模型組差異表達(dá)基因涉及多個(gè)生物學(xué)過程和信號(hào)通路。在造模因素作用下,基因Rhoa、RGD1306349、Nsd1、Figf、Brd4、Crebbp
4、、Sos2、Irf2、Brd2、Tspyl2、Eif4g2、Lcor、Isy1、Sf3a3、Msl2l1、Myo9a、Papolg、Vasp、Pdcd7、Zbtb11、RGD1559904、Csnk1g1、Leng8、Ddx10、Arhgef3、Smg6、Zfat、Tm9sf3、Otud5和Chd6表達(dá)上調(diào),在溫陽消飲法代表方干預(yù)下表達(dá)下調(diào);Ksr1、Slc25a27、Ptrf、Efemp1、RGD1563319、Cyb5r3、Gpr1
5、35、Polr3gl、Kcna5、Ugp2、Acad11和Btbd11在造模條件下表達(dá)下調(diào),用溫陽消飲法代表方治療后上調(diào)。
結(jié)論:前期研究發(fā)現(xiàn),溫陽消飲法有助于λ-角叉菜膠誘導(dǎo)的豚鼠胸腔積液的吸收。本實(shí)驗(yàn)表明,其機(jī)制可能與苓桂術(shù)甘湯合葶藶大棗瀉肺湯給藥調(diào)控多個(gè)生物學(xué)過程及信號(hào)通路有關(guān)。本研究從基因水平揭示了溫陽消飲法的部分機(jī)制:①溫陽消飲法可下調(diào)壁層胸膜炎癥促進(jìn)基因Mef2a、凋亡誘導(dǎo)基因Dyrk2和Tp53i11表達(dá),改善炎
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