基于經(jīng)絡(luò)皮部理論的苗藥組方熏洗療法對(duì)骨關(guān)節(jié)炎模型家兔軟骨細(xì)胞影響的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀察苗藥組方熏洗對(duì)骨關(guān)節(jié)炎模型家兔軟骨細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑的影響，探討皮部苗藥組方熏洗療法防治骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變的分子機(jī)制，為該療法的推廣應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　方法:52只家兔隨機(jī)抽取10只為正常組，其余42只家兔采用兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射木瓜蛋白酶制造KOA模型，隨機(jī)抽取2只通過(guò)肉眼和光境下檢測(cè)造模是否成功，將造模后的家兔隨機(jī)分為模型組、熏蒸組、洗組、熏洗組。熏蒸組、洗組、熏洗組用苗藥組方熏、洗治療20天后，肉眼

2、觀察軟骨組織的病理改變，培養(yǎng)軟骨細(xì)胞，制備軟骨細(xì)胞爬片及HE染色，免疫組化檢測(cè)軟骨細(xì)胞MMP-1、TIMP-1蛋白表達(dá)，熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)MMP-1、TIMP-1 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)肉眼即可觀察到關(guān)節(jié)軟骨表面的改變，正常組軟骨表面光滑，色澤明亮潤(rùn)澤，為半透明狀，具有一定的彈性，無(wú)裂紋及軟化;模型組軟骨表面極不光滑，色澤晦暗，呈纖維狀，局部軟骨有缺損，甚至出現(xiàn)潰瘍，軟骨邊緣形成較多骨贅;熏組及洗組軟骨稍不平整，裂

3、隙少，表面有細(xì)小潰瘍出現(xiàn)，軟骨稍有缺損;熏洗組軟骨色澤較暗，顏色淡白，脛骨平臺(tái)變淺，軟骨基本完整，無(wú)潰瘍出現(xiàn)。(2)免疫組化檢測(cè)軟骨細(xì)胞MMP-1、TIMP-1的蛋白表達(dá):MMP-1平均透光度，正常組與其它四組比較有極顯著性差異(P＜0.01);模型組與洗組、熏蒸組、熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);苗藥洗組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);熏蒸組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);熏洗組與其它四組比較有極顯著

4、性差異(P＜0.01);熏組與洗組比較有顯著性差異(P＜0.05);TIMP-1平均透光度，正常組與其它四組比較有極顯著性差異(P＜0.01)，模型組與洗組、熏蒸組、熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);苗藥洗組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01)，與熏蒸組比較有極顯著性差異(P＜0.01);熏蒸組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);熏洗組與其它四組比較有極顯著性差異(P＜0.01)。(3)熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)MMP

5、-1、TIMP-ImRNA的表達(dá)可知，正常組與其它四組比較有極顯著性差異(P＜0.01)，模型組與洗組、熏蒸組、熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);苗藥洗組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01)，與熏蒸組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;熏蒸組與熏洗組比較有極顯著性差異(P＜0.01);熏洗組與其它四組比較有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察基于經(jīng)絡(luò)皮部理論的苗藥組方熏洗療法對(duì)骨關(guān)節(jié)炎模型家兔軟骨細(xì)胞影響的分子機(jī)制