苗藥皮部熏洗對骨關(guān)節(jié)炎大鼠凋亡與增殖調(diào)控因子的影響.pdf

1、目的:本課題通過研究苗藥皮部熏洗療法對骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis OA)大鼠痛行為(pain behaviors)及p53、bcl-2、增殖細(xì)胞核抗原(ProliferatingCell Nuclear Antigen，PCNA)、轉(zhuǎn)移生長因子-β1(transforming growth factorβ1，TGF-β1)的影響，進(jìn)一步探討苗藥皮部熏洗法治療骨關(guān)節(jié)炎的部分機(jī)理。并通過熏法、洗法單獨(dú)應(yīng)用對照比較，研究它們治療O

2、A的療效差別，為此療法的推廣應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為治療骨關(guān)節(jié)炎提供新的思路和方法。
　　 方法:取42只健康清潔級大鼠，隨機(jī)選取8只不造模作為正常對照組，其余34只采用4％木瓜蛋白酶關(guān)節(jié)腔注射建立大鼠OA模型，一周后隨機(jī)選取2只檢測模型成功與否，將造模成功的32只大鼠隨機(jī)分為模型組、熏組、洗組和熏洗組，治療4周后處死動(dòng)物，切取關(guān)節(jié)，大體及組織學(xué)觀察，取各組脛骨平臺關(guān)節(jié)軟骨，采用HE染色進(jìn)行Mankin's評分，免疫組化染色法測定

3、p53、bcl-2、PCNA及TGF-β1的表達(dá)。
　　 結(jié)果:大體觀察模型組肉眼即可觀察到關(guān)節(jié)軟骨表面的改變，光鏡下觀察正常組:關(guān)節(jié)軟骨4層結(jié)構(gòu)清晰，軟骨面光滑、完整，軟骨細(xì)胞排列整齊，基質(zhì)染色均勻;模型組:滑膜部分呈結(jié)節(jié)樣增生，軟骨細(xì)胞減少，軟骨下骨暴露，骨贅形成，血管增生明顯，潮線不完整或消失;熏組及洗組:軟骨表面稍不平整，裂隙少，細(xì)胞排列較規(guī)則，增生明顯，潮線模糊;熏洗組:軟骨表面光滑、完整，細(xì)胞排列規(guī)則，結(jié)構(gòu)層次清晰，

4、潮線清楚。Mankin's評分結(jié)果顯示:與模型組比較，各治療組均降低Mankin's評分(P＜0.05，P＜0.01)，且熏洗組與熏組、洗組相比具極顯著性差異（P＜0.01）。各治療組痛閾顯著升高(P＜0.05)，熏洗組升高最明顯，具有顯著性差異(P＜0.01)。正常組大多數(shù)標(biāo)本未見p53與bcl-2表達(dá)，造模后見到散在的p53與bcl-2表達(dá)，熏洗后bcl-2的表達(dá)有逐漸增強(qiáng)、p53的表達(dá)有逐漸減弱的趨勢;正常組有少量PCNA和TGF

5、-β1陽性細(xì)胞的表達(dá)，模型組中表達(dá)明顯，治療組均比模型組升高(P＜0.05)，其中熏洗組與模型組比有極顯著性差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:(1)通過苗藥皮部熏洗防治的干預(yù)，對OA模型大鼠的痛行為及膝關(guān)節(jié)活動(dòng)有明顯的改善作用。(2)苗藥皮部熏洗通過上調(diào)軟骨bcl-2的表達(dá)和下調(diào)p53的表達(dá)，來延緩軟骨細(xì)胞的凋亡;并通過上調(diào)軟骨PCNA和TGF-β1的的表達(dá)，促進(jìn)軟骨細(xì)胞的增殖，加速軟骨的修復(fù)，達(dá)到防治OA的目的。(3)熏洗法