兔VX-2口底癌動物模型建立的實驗研究.pdf

1、目的：建立適合局部治療研究用的兔VX-2口底癌動物模型，并對其生物學特性進行研究。同時，探討腫瘤模型影像學及病理學表現(xiàn)，為口底癌治療提供研究平臺。
　　 方法：⑴荷瘤種兔的制作首先對凍存的VX-2瘤組織塊進行相應(yīng)的復(fù)蘇，然后建立荷瘤種兔以獲得實驗中需要的腫瘤組織塊。⑵兔口底惡性腫瘤模型的制作30只純種的新西蘭大白兔，雌雄不限，兔齡2～3月，體重1.5～2.0kg，隨機分成2組(每組15只)，均在標準實驗室飼養(yǎng)；從荷瘤種兔身上剝離

2、VX-2腫瘤組織塊，制備成移植所用的一定大小的VX-2腫瘤組織塊及細胞懸液，分別采用VX-2瘤塊組織植入法(A組)及改良瘤細胞懸液注射法(B組)接種于實驗兔的口底正中區(qū)以制作兔VX-2口底惡性腫瘤模型。⑶觀察指標及統(tǒng)計數(shù)據(jù)觀察記錄實驗兔的術(shù)后清醒時間、并發(fā)癥情況、實驗兔的精神、食欲、活動有無異常；分別于實驗兔接種術(shù)后第1周、第2周、第3周、第4周時觀察瘤灶的大體表現(xiàn)，且分別行顱腦及頸部的CT及MR掃描檢查，檢查口底部位有無腫瘤形成及頸部

3、有無腫大及轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，記錄肉眼及CT及MR掃描檢查三種手段所發(fā)現(xiàn)的腫瘤的大小、數(shù)目、部位，記錄CT及MR掃描檢查發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)移腫大淋巴結(jié)的數(shù)目、大小和部位，統(tǒng)計實驗兔的成瘤率；統(tǒng)計實驗兔的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及肺轉(zhuǎn)移率；計算腫瘤的生長率，對兩組實驗兔成瘤率及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及肺轉(zhuǎn)移率進行比較；觀察實驗動物自然生存情況；死亡后尸檢；腫瘤組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及器官經(jīng)10％福爾馬林固定后行病理檢查。
　　 結(jié)果：26只實驗兔發(fā)現(xiàn)瘤灶，總成瘤率8

4、6.67％(26/30)，其中組織塊植入法(A組)成功率為80.00％(12/15)，改良瘤細胞懸液注射法(B組)成功率為93.33％(14/15)，兩組接種成功率無顯著差異(P>0.05)；本實驗中26只成瘤兔中20只發(fā)現(xiàn)頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，頸淋巴結(jié)總轉(zhuǎn)移率為76.92％(20/26)，10只發(fā)生肺轉(zhuǎn)移，總肺轉(zhuǎn)移率為38.46％(10/26)；其中改良瘤細胞懸液注入組的局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為92.86％(13/14)，肺轉(zhuǎn)移率為57.14％(

5、8/14)，均為最高；瘤組織塊植入組的局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為58.33％(7/12)，肺轉(zhuǎn)移率為16.67％(2/12)；兩組實驗兔的成瘤率、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、肺轉(zhuǎn)移率相比差異均無統(tǒng)計學意義。整個模型建立過程操作步驟簡單，成瘤率高。A、B兩組實驗兔的飲食、精神、活動等一般生物性特點無明顯差異。觀察所建成的兔口底癌動物模型發(fā)現(xiàn)VX-2腫瘤經(jīng)歷了3個主要階段：腫瘤迅速增長階段、腫瘤中心壞死階段、表面破潰階段，平均生存期約為6～8周。瘤體和淋巴結(jié)

6、標本病理切片HE染色鏡下觀察，均為中分化鱗癌，證實成瘤及出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
　　 結(jié)論：采用組織塊移植法及改良細胞懸液注射法兩種方法制作兔VX-2口底癌動物模型，其成瘤率、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、肺轉(zhuǎn)移率、生長率、腫瘤性質(zhì)、腫瘤生長特點等比較均無統(tǒng)計學意義。采用CT及MR兩種影像學檢查手段對瘤灶進行動態(tài)的檢測、評價，可以更加及時、準確地觀察瘤灶的發(fā)生、發(fā)展等影像學改變。通過上述兩種操作方法制作的兔口底部鱗癌模型具有操作簡單、耗時短、重復(fù)