鉬銅聯(lián)合對動物腎臟的毒性影響.pdf

1、目的：鉬和銅是動物機體生長發(fā)育所需的微量元素，在動物機體的發(fā)育、代謝以及機體免疫中都發(fā)揮著重要的作用。機體攝入過量的鉬和銅會導(dǎo)致中毒，從而對動物體的生長，代謝以及腎臟的功能產(chǎn)生不良影響。目前，國內(nèi)外關(guān)于鉬和銅中毒多以單一元素或者高鉬低銅，亦或者低鉬高銅進行研究，關(guān)于鉬銅聯(lián)合作用對腎臟影響的報道較少。
　　方法：試驗采用體外培養(yǎng)細胞的方法，對原代小鼠腎細胞進行培養(yǎng)，試驗分為四組，Ⅰ組（銅0μmol/L，鉬0μmol/L）、Ⅱ組（銅1

2、200μmol/L）、Ⅲ組（鉬800μmol/L）和Ⅳ組（銅1200μmol/L，鉬800μmol/L）。通過 MTT法對細胞增殖進行檢測。使用試劑盒對細胞超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化物酶（POD）和丙二醛(MDA）進行檢測。用 Western Blot法檢測Bcl-2，BAX，Caspase-3蛋白量的表達。
　　試驗使用同等原代小鼠細胞試驗的鉬銅比例進行雞活體試驗，試驗設(shè)四組，Ⅰ組（銅0

3、mg/kg，鉬0mg/kg）、Ⅱ組（銅1200mg/kg）、Ⅲ組（鉬800mg/kg）和Ⅳ組（銅1200mg/kg，鉬800mg/kg)。選用海蘭褐殼蛋公雛雞80只，每組20只，試驗周期60天，每15天每組隨機抽取5只剖殺取樣。使用試劑盒檢測雞腎臟組織氧化與抗氧化酶活性，超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化物酶（POD）和丙二醛（MDA）進行檢測。做腎臟組織病理切片檢測組織學(xué)變化。通過電感耦合等離子體質(zhì)譜

4、儀檢測腎臟組織中微量元素鉬銅含量的變化。
　　結(jié)果：1、以小鼠腎細胞Ⅱ組，Ⅲ組，Ⅳ組為試驗對象，進行了鉬銅對小鼠腎細胞增殖的毒性試驗，其結(jié)果顯示鉬銅使細胞增殖活力下降，Ⅳ組的毒性結(jié)果與Ⅲ組的毒性結(jié)果差異不顯著。小鼠腎細胞抗氧化SOD、GSH-Px、POD和脂質(zhì)過氧化 MDA能力檢測，試驗組降低了細胞抗氧化酶活性，增高了 MDA的活性，Ⅳ組與Ⅲ組對細胞產(chǎn)生的影響差異不顯著。
　　2、通過Western Blot檢測結(jié)果顯示鉬銅

5、導(dǎo)致細胞抗凋亡蛋白Bcl-2表達量降低，促凋亡蛋白 BAX和 Caspase-3表達量增高，Ⅳ組與Ⅲ組中細胞凋亡差異不顯著。
　　3、以雞腎組織進行的試驗結(jié)果顯示，試驗組中腎小管管腔發(fā)生腫脹崩解，腎小管上皮發(fā)生萎縮脫落壞死，腎小球受到損傷使腎小管管腔中含有蛋白質(zhì)碎片，試驗選用的鉬銅劑量對雞腎臟的損傷與時間呈正相關(guān)。當雞分別攝入鉬和銅時，其在腎臟中的含量呈負相關(guān)，當同時攝入鉬銅時其總體含量增高，與單獨使用鉬和銅相比，鉬銅聯(lián)合使用促進

6、雙方在體內(nèi)代謝。試驗組中鉬銅對雞腎臟抗氧化能力 SOD、GSH-Px和 POD產(chǎn)生的影響使其抗氧化能力降低，Ⅲ組與Ⅳ組之間差異不顯著，Ⅳ組與Ⅱ組比較顯著增高；脂質(zhì)過氧化 MDA活性升高，Ⅲ組與Ⅳ組之間差異不顯著，Ⅳ組與Ⅱ組比較顯著降。
　　結(jié)論：本試驗從細胞毒性、氧化損傷、細胞凋亡、組織病理變化及組織中微量元素鉬銅含量的變化等方面，初步探討了高劑量鉬、銅對腎臟的影響，證實了試驗選用的鉬銅劑量能夠?qū)δI產(chǎn)生毒性，使小鼠腎細胞增殖活性下