高鉬低銅對(duì)雄性小鼠生殖功能的影響.pdf

1、目的：為研究高鉬、低銅及兩因素協(xié)同作用對(duì)雄性小鼠生殖功能的影響。
　　方法：將80只健康雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為4組，每組20只。配制低鉬低銅飼料，通過在飲水中添加不同劑量的鉬和銅，建立試驗(yàn)?zāi)Ｐ停簩?duì)照組（ Mo：0mg·L-1， Cu：3mg·L-1）、低銅組（ Mo：0mg·L-1， Cu：0mg·L-1）、高鉬組（ Mo：600mg·L-1， Cu：3mg·L-1）和高鉬低銅組（ Mo：600 mg·L-1， Cu：0 mg·L

2、-1）。在試驗(yàn)處理的第90天，每組隨機(jī)處死10只供試小鼠，采集睪丸、附睪等樣品，用HE染色、透射電鏡、試劑盒、免疫組化、熒光免疫等技術(shù)，在顯微、超微結(jié)構(gòu)，細(xì)胞、蛋白等水平上研究高鉬低銅對(duì)雄性小鼠生殖功能的影響。
　　結(jié)果：1.睪丸系數(shù)的變化：與對(duì)照組相比，高鉬組睪丸系數(shù)降低3.0％(P<0.01)，高鉬低銅組睪丸系數(shù)降低6.7%(P<0.01)，與高鉬組相比，高鉬低銅組睪丸系數(shù)降低4.0%(P<0.01)，與低銅組相比，高鉬低銅組

3、睪丸系數(shù)降低3.8%(P<0.01)。
　　2.微核率測(cè)定結(jié)果：與對(duì)照組相比較，高鉬組，低銅組，高鉬低銅組睪丸微核率分別升高95.1%，78.3%，142%，差異均極顯著(P<0.01)；高鉬低銅組比高鉬組睪丸微核率高24.0%(P<0.05)，高鉬低銅組比低銅組微核率高35.8%(P<0.01)。
　　3.小鼠精液品質(zhì)測(cè)定結(jié)果：與對(duì)照組相比，高鉬組，低銅組，高鉬低銅組小鼠附睪內(nèi)精子密度分別下降25.6%，27.9%，40.

4、9%，差異極顯著(P<0.01)，高鉬低銅組比高鉬組降低20.5%(P<0.05)；高鉬低銅組比低銅組降低18.3%(P<0.05)。高鉬組，低銅組，高鉬低銅組精子活動(dòng)率分別比對(duì)照組降低12.1%，12.5%，39.5%(P<0.01)；高鉬低銅組比高鉬組精子活動(dòng)率降低31.1%(P<0.01)；高鉬低銅組比低銅組精子活動(dòng)率降低31.2%(P<0.01)。與對(duì)照組相比，高鉬組，低銅組，高鉬低銅組小鼠附睪內(nèi)精子畸形率分別升高50.0%，4

5、5.4%，93.1%差異均極顯著(P<0.01)；高鉬低銅組比高鉬組精子畸形率高28.7%(P<0.05)；高鉬低銅組比低銅組精子畸形率高32.8%(P<0.05)；
　　4.睪丸組織常規(guī)切片顯示：對(duì)照組睪丸組織曲細(xì)精管形態(tài)規(guī)則，結(jié)構(gòu)完整，生精細(xì)胞排列緊密，層次分明，管腔內(nèi)有較多量的精子；低銅組睪丸組織整體結(jié)構(gòu)上沒有明顯的形態(tài)學(xué)損傷，僅可觀察到少量生精細(xì)胞空泡化以及精子凋亡等現(xiàn)象；高鉬組睪丸曲細(xì)精管形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯改變，各級(jí)生精細(xì)

6、胞和支持細(xì)胞數(shù)量減少，排列紊亂，空泡化明顯，成熟的精子明顯減少，甚至消失；高鉬低銅組曲精小管結(jié)構(gòu)紊亂、生精細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞變性壞死明顯增多，空泡化嚴(yán)重。
　　5.睪丸組織電鏡切片結(jié)果：對(duì)照組小鼠睪丸組織細(xì)胞核膜清晰，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均勻分布，精子細(xì)胞尾部中段的線粒體排列整齊、結(jié)構(gòu)完整；高鉬組部分生精細(xì)胞線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張；低銅組的小鼠睪丸組織細(xì)胞存在低頻率的膜變化，少部分精子細(xì)胞頂體膜模糊、不連續(xù)；高鉬低銅組小鼠睪丸組織細(xì)胞核固縮，線粒體

7、腫脹、空泡化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，核膜不清、精細(xì)胞頂體脫落等。
　　6.睪丸抗氧化酶測(cè)定結(jié)果：高鉬組，低銅組小鼠睪丸組織內(nèi)MDA含量分別比對(duì)照組高34.5%，33.3%(P<0.05)；高鉬低銅組比對(duì)照組高111%(P<0.01)。高鉬低銅組比高鉬組高56.8%(P<0.01)，高鉬低銅組比低銅組高58.3%(P<0.01)。與對(duì)照組相比，高鉬組，低銅組，高鉬低銅組小鼠睪丸組織內(nèi)SOD活性分別下降19.8%，19.6%，45.8%，差異均

8、為極顯著(P<0.01)，高鉬低銅組比高鉬組降低32.4%(P<0.01)，高鉬低銅組比低銅組降低31.1%(P<0.01)。高鉬組，低銅組睪丸組織內(nèi)GSH-Px活性分別比對(duì)照組降低22.1%，32.8%，差異顯著(P<0.05)，高鉬低銅組比對(duì)照組降低45.0%(P<0.01)，高鉬低銅組比高鉬組降低29.3%(P<0.05)。
　　7.睪丸組織免疫組化顯示：對(duì)照組TNF-α表達(dá)平均光密度值為0.582，低銅組TNF-α表達(dá)平均