促性腺激素釋放激素拮抗劑與激動(dòng)劑對(duì)卵巢過(guò)度刺激大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及受體表達(dá)的影響.pdf

1、研究目的檢測(cè)卵巢上VEGF及其受體flt-1、KDR的表達(dá)與大鼠OHSS發(fā)生的相關(guān)性，了解VEGF在OHSS發(fā)病中的作用。采用促性腺激素釋放激素拮抗劑(GnRHanta)與激動(dòng)劑(GnRHa)處理過(guò)度刺激大鼠模型，通過(guò)檢測(cè)VEGF及受體表達(dá)與過(guò)度刺激情況的關(guān)系，探討其降低OHSS發(fā)生的可能機(jī)制及作用特點(diǎn)。 研究方法未成熟雌性Wistar大鼠22日齡，體重38.0-42.0g，40只隨機(jī)分成五組，OHSS組，GnRHa短方案組，G

2、nRHa長(zhǎng)方案組，GnRHanta組，生理鹽水(NS)對(duì)照組。在hCG注射后48h，股靜脈注射0.5％的Evans-blue0.2ml。30min后頸椎脫臼處死，切開(kāi)腹腔，收集腹腔沖洗液，紫外分光光度計(jì)檢測(cè)Evans-blue在600nm的OD值，解剖出雙側(cè)卵巢，計(jì)卵巢重量，置于-70℃冷凍保存，待冰凍切片行熒光顯微鏡觀察Evans-blue的自發(fā)熒光效應(yīng)及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)VEGF，VEGF異構(gòu)體(VEGF164

3、,VEGF120)及兩種受體flt-1、KDR的表達(dá)水平。 結(jié)果OHSS組雙側(cè)卵巢明顯增大，腹腔沖洗液Evans-blue的濃度明顯高于對(duì)照組，血管通透性明顯增加，表明OHSS模型成功制備。RT-PCR檢測(cè)到VEGF的兩種異構(gòu)體VEGF120與VEGF164在過(guò)度刺激大鼠卵巢上表達(dá)，并且較對(duì)照組顯著升高，其受體flt-1，KDRmRNA的表達(dá)也明顯增加，表明OHSS的發(fā)生可能通過(guò)VEGF及其受體表達(dá)上調(diào)導(dǎo)致毛細(xì)血管通透性升高。G

4、nRHanta與GnRHa明顯降低卵巢過(guò)度刺激大鼠的毛細(xì)血管通透性，同時(shí)卵巢上VEGF及l(fā)ft-1、KDRmRNA表達(dá)也明顯降低。GnRHanta與長(zhǎng)方案GnRHa相比VEGF160表達(dá)下降，而flt-1與KDR表達(dá)以GnRHa長(zhǎng)方案組降低更為明顯，兩者之間僅flt-1的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，KDR的表達(dá)無(wú)顯著差異，但兩者降低毛細(xì)血管通透性的作用是一致的。 結(jié)論GnRHanta與GnRHa可能通過(guò)下調(diào)VEGF及受體flt-1，KDR

5、的表達(dá)，降低毛細(xì)血管通透性，進(jìn)而減少OHSS的發(fā)生，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示GnRHanta與長(zhǎng)方案GnRHa治療降低血管通透性的效果是一致的。GnRHanta可以迅速降低毛細(xì)血管的通透性，對(duì)卵巢重量的降低遠(yuǎn)不如對(duì)毛細(xì)血管通透性的改變，此特殊性給那些超排卵過(guò)程中雙側(cè)卵巢大量卵泡發(fā)育的OHSS高危患者，應(yīng)用GnRHanta阻止、推遲LH峰從而預(yù)防OHSS的發(fā)生提供了一定的參考意義，對(duì)已經(jīng)發(fā)生重度OHSS的患者，注射GnRHanta可能通過(guò)GnRH