MGMT自身抗體指導(dǎo)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤化療的臨床價(jià)值探討.pdf

1、O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)基因編碼769bp的全長(zhǎng)cDNA序列，含一個(gè)621bp的開(kāi)放性閱讀框架，編碼207個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為22ku，其活性位點(diǎn)在145位的半胱氨酸殘基上，可在無(wú)條件下催化DNA分子中鳥嘌呤O6位上的烷基并將其轉(zhuǎn)移至MGMT第145位的半胱氨酸殘基上，使鳥嘌呤損傷修復(fù)，DNA的結(jié)構(gòu)和功能得以恢復(fù)，同時(shí)MGMT在轉(zhuǎn)甲基后將不可逆地失去活性。目前，還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其他蛋白質(zhì)可參與此過(guò)程，正是這種原理使替

2、莫唑胺(Temozolomide TMZ)的化療失去效果。
　　目的:
　　本研究基于多肽微陣列(polypeptide Microarray)新技術(shù)探索多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(Glioblastoma multiforme GBM)患者血清中耐藥基因MGMT自身抗體(AutoAntibody)在化療中的價(jià)值。
　　方法:
　　以28例人腦膠質(zhì)瘤組織，其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GMB)20例，星形細(xì)胞瘤8例，以及4例人正常腦

3、組織為研究對(duì)象，分別采用多肽微陣列技術(shù)檢測(cè)患者血清中MGMT自身抗體對(duì)多肽的響應(yīng)、甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-specificPCR MSP)檢測(cè)組織中MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況、免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry IHC)法檢測(cè)組織中MGMT蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　28例膠質(zhì)瘤標(biāo)本中，MGMT自身抗體對(duì)多肽響應(yīng)9例，未響應(yīng)19例，響應(yīng)率為32.1％; MGMT基因啟動(dòng)

4、子區(qū)甲基化10例，去甲基化18例;MGMT蛋白表達(dá)陽(yáng)性14例，陰性14例。4例正常腦組織中MGMT自身抗體對(duì)多肽均未響應(yīng)，啟動(dòng)子區(qū)均為去甲基化，蛋白表達(dá)均陰性。其中在20例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者中，MGMT自身抗體對(duì)多肽的響應(yīng)結(jié)果與啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)呈正相關(guān)(r=0.579，P＜0.01);MGMT蛋白表達(dá)與啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.533，P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　初步斷定正常人血清中可能不存在MGMT自身抗

5、體，而膠質(zhì)瘤患者血清中MGMT自身抗體對(duì)多肽有響應(yīng)。在20例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者中，MGMT多肽微陣列及免疫組化檢測(cè)結(jié)果與MSP檢測(cè)結(jié)果存在明顯的相關(guān)性，多肽微陣列技術(shù)檢測(cè)血清MGMT自身抗體在預(yù)測(cè)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者對(duì)替莫唑胺耐藥性上有一定的作用，通過(guò)檢測(cè)患者外周血清MGMT肽段的自身抗體來(lái)判斷膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者對(duì)替莫唑胺的敏感性，不僅解決了由于無(wú)法獲取腫瘤組織進(jìn)行分子和病理學(xué)檢查而導(dǎo)致的對(duì)病人化療的盲目性，也能夠判斷患者是否在化療進(jìn)程中繼發(fā)出