干酪中五種生物胺的HPLC快速分析技術(shù)研究.pdf

1、干酪在世界各國素有“乳制品之王”的美稱，是一種營養(yǎng)價值豐富的產(chǎn)品。我國乳品工業(yè)在經(jīng)歷乳粉、液態(tài)乳加工階段后，進入干酪階段。在干酪的成熟過程中，會形成生物胺。高濃度的生物胺不僅影響食品風味，而且對人體有嚴重的危害，應引起足夠重視。因此建立一種適用于干酪中生物胺的快速分析技術(shù)是十分必要的。 本試驗從分析樣品前處理、衍生、檢測器入手，建立了一個簡便、快捷、靈敏、高效的液相色譜分析方法，得到了以下研究結(jié)果： 1。以鄰苯二甲醛(O

2、PA)為衍生試劑，構(gòu)建了一個生物胺柱前衍生HPLC分析條件。衍生條件：衍生2min，乙酸乙酯萃取6min后HPLC分析。色譜條件：大連依利特HypersilODS2(4.6mmx250mm，5μm)色譜柱；紫外檢測波長為335nm；熒光檢測激發(fā)波長(Ex)336nm，發(fā)射波長(Em)466nm；流動相為KH2PO4-甲醇(體積比30:70)，流速0.8mL·min-1，進樣量10μL，柱溫35℃。 2.分別運用HPLC-熒光檢測

3、器和HPLC-二極管陳列檢測器，對五種生物胺進行檢測。熒光檢測在0.1～10mg·L-1濃度范圍內(nèi)呈線性范圍，組胺、酪胺最低檢出限為0.010mg·L-1，色胺最低檢出限為0.005mg.L-1，腐胺、尸胺最低檢出限為0.015mg.L-1。紫外檢測在4～40mg·L-1的濃度范圍內(nèi)呈線性范圍，組胺最低檢出限為2mg·L-1，酪胺、尸胺最低檢出限為0.8mg·L-1，色胺、腐胺最低檢出限為1mg·L-1。 3.采用三氯乙酸、無水

4、乙醇、甲醇為提取溶劑，對干酪樣品進行提取。樣品勻漿提取2次、正己烷凈化處理、衍生后，進行HPLC分析，采用外標法定量。 (1)三氯乙酸提取：添加量為2.5mg·L-1時，熒光測定回收率達到80.4％～107.1％，相對標準偏差小于7.8％。添加量為5.0mg·L-1時，熒光測定回收率達到78.2％～101.3％，相對標準偏差小于6.1％；紫外測定回收率達到80.0％～110.7％，相對標準偏差小于6.7％。添加量為10mg·L-

5、1時，熒光測定回收率達到79.6％～106.6％，相對標準偏差小于6.0％；紫外測定回收率達到75.7％～103.1％，相對標準偏差小于7.6％。 (2)無水乙醇提?。禾砑恿繛?.0mg·L-1時，熒光測定回收率在37.8％～118.0％之間，相對標準偏差在5.1％～21.2％之間；紫外測定回收率在23.5％～115.2％之間，相對標準偏差在1.1％～15.2％之間。添加量為10mg·L-1時，熒光測定回收率在39.5％～150

6、.9％之間，相對標準偏差在2.9％～19.5％之間；紫外測定回收率在38.3％～131.1％之間，相對標準偏差在1.6％～15.7％。 (3)無水甲醇提?。禾砑恿繛?.0mg·L-1時，熒光測定回收率在48.2％～127.7％之間，相對標準偏差在5.4％～28.0％之間；紫外測定回收率在63.2％～113.9％，相對標準偏差在4.0％～26.4％之間。添加量為10mg·L-1時，熒光測定回收率在26.7％～148.4％之間，相對