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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文甲狀旁腺相關(guān)肽調(diào)控骨骺干細(xì)胞后的stathmin表達(dá)姓名：周治國申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（骨科）指導(dǎo)教師：郭風(fēng)勁20080901華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文6ExpressionLevelofstathminFollowingthePrecartilaginousStemCellsModulatedbyParathyroidHmonerelatedProtein(Abstract)【Ob
2、jective】:TostudythemodulatingeffectsofPTHrPPTHrP(107139)plainculturedprecartilaginousstemcellsinvitrotheexpressionlevelofstathminafterthetransfectionoftheplas.【Methods】:1.ObtainprecartilaginousstemcellsofLaCroixringbyexc
3、isingthechondrocytesfromneonateratofSDratsthroughthemicroscopepurifythembyimmunomagicbeadsmethodtoextractprototypeprecartilaginousstemcells.2.TransfmationisolationidentificationoftheplasDNAofpTetonpTRE2hygPTHrP(107139)PT
4、HrP.3.WiththecontrolgrouptheplasofpTRE2hygPTHrp(107139)pTetonwerecotransfectedbylipofectamine2000intoprecartilaginousstemcellsatthesameperiodthePTHrptotalplasweretansfectedintoprecartilaginousstemcellshomoplasticly.Thepr
5、ecartilaginousstemcellswerefirstlyculturedinthemediumwereinducedbyDoxycyclinewhichwasaddedwith1.0gmlrespectively.AtthefourthtwentyfourthseventysecondnintysixthhourafterbeingtransfectedtheRNAofthecellsofeachgroupwereextra
6、ctedthenwereexaminedbyRTPCRtoinvestigatethechangesofexpressionofmRNA.AcdingtotheexperimentthecellswereexaminedwithWesternblottodetecttheexpressionlevelofstathmininthetransfectedcellsatthedesignedshedule.ThenthecellcycleA
7、poptosiswasexaminedbyflowcytometry.【Results】:1.TheobjectivegenecouldbemodulatedpreciselybythecontrolofpTetongeneaidingsystemintheprecartilaginousstemcells.2.Thequantitivelevelofprecartilaginousstemcellsincreasedsignifica
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