Th17在口腔鱗癌微環(huán)境中的分布及抑瘤作用初探.pdf

1、目的：探索OSCC患者體內(nèi)的Th17水平是否存在異常情況，探索其對OSCC是否存在抑制作用及其機制如何。以此為切入點尋找控制腫瘤的靶點，為開發(fā)新的免疫療法打下基礎(chǔ)。
　　方法：采用流式細胞術(shù)檢測并比較了OSCC患者和對照組外周血中Th17及相關(guān)免疫細胞Treg的水平；檢測了OSCC腫瘤組織內(nèi)的Th17及Treg的浸潤情況，分析了二者的相關(guān)關(guān)系；采用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法將全基因合成的人IL-17轉(zhuǎn)染至人舌癌細胞系TCA8113中；采用基因轉(zhuǎn)

2、染提高內(nèi)源性IL-17的方法改變腫瘤微環(huán)境并結(jié)合人源化hu-PBL-SCID-beige小鼠荷瘤模型，探究提高腫瘤微環(huán)境中的Th17的可行性及Th17的可能誘導機制和抑瘤機制。
　　結(jié)果：第一部分：1、OSCC患者外周血中Th17細胞含量高于正常對照組；2、OSCC患者外周血中CD4+CD25highFoxP3+細胞含量與對照組無明顯差異；3、OSCC患者外周血中CD4+CD25highCD127low細胞含量高于正常對照；4、外

3、周血Treg中CD31+Treg比例OSCC患者高于對照組；5、腫瘤局部微環(huán)境中存在Th17細胞及Treg的浸潤；6、腫瘤局部微環(huán)境中Th17和Treg成反相關(guān)關(guān)系。
　　第二部分：成功建立了IL-17A穩(wěn)定表達的TCA8113/IL-17細胞系，形態(tài)良好，增殖正常，目的蛋白表達正常。
　　第三部分：1、成功建立了Hu-PBL-SCID-beige小鼠免疫重建模型，全部小鼠外周血中均可檢測到human-IgG，濃度較高，平均

4、達2.105g/L，重建成功率100％；2、分別構(gòu)建了TCA8113、TCA8113/IL-17和TCA8113/pcDNA3.1細胞的移植瘤模型，成瘤率95%；3、T+17組小鼠腫瘤生長速度與T組和T+P相比有所減慢，最終腫瘤體積T+17組（1.219±0.626cm3）小于T組（2.858±1.188cm3）和T+P組（2.593±1.199cm3）；4、T+17組的腫瘤組織內(nèi)IL-17a、IL-6、顆粒酶B以及RORγt的mRNA

5、及蛋白表達水平高于T組及T+P組。
　　結(jié)論：1、OSCC患者外周存在Th17及Treg的水平升高，但兩者不相關(guān)，患者整體免疫微環(huán)境呈現(xiàn)免疫抑制狀態(tài)；2、CD4+CD25highCD127low作為Treg的篩選方式優(yōu)于CD4+CD25highFoxP3+；3、OSCC微環(huán)境中存在Th17及Treg的浸潤現(xiàn)象，兩者水平呈負相關(guān)，OSCC微環(huán)境中的Treg可能對Th17的分化和功能起抑制作用；4、采用腹腔注射PBL建立hu-PBL-